一、新鲜人羊膜移植在重建眼表结构中的临床应用（论文文献综述）
李楠钰[1]（2020）在《羊膜-纤维蛋白胶泥的制备及其治疗兔重度眼表碱烧伤的实验研究》文中研究指明[目 的]采用37℃恒温干燥箱风干羊膜,经液氮预冷后研磨制备新型羊膜粉,将新型羊膜粉与纤维蛋白胶结合制成羊膜-纤维蛋白（AM-FS）胶泥,利用体外细胞实验研究含不同浓度新型羊膜粉的AM-FS胶泥对兔角膜上皮细胞增殖的影响,结合在体动物实验研究AM-FS胶泥在兔重度眼表碱烧伤模型中的治疗效果。[方 法]制备新型羊膜粉:将洗净的新鲜羊膜置于37℃恒温干燥箱风干,液氮预冷后研磨成直径<260um的新型羊膜粉,γ射线灭菌;用生长因子芯片检测并比较新型羊膜粉及新鲜羊膜中bFGF、TGF β、NGF R、HGF、EGF的表达;根据保存条件将新型羊膜粉分为三组（室温保存组、4℃保存组、-20℃保存组）,每隔10d、20d、30d重复检测并比较生长因子的表达情况,探索新型羊膜粉的最佳保存方法。体外细胞实验:配制含不同新型羊膜粉浓度的AM-FS胶泥（65mg/ml、32mg/ml、16mg/ml、8mg/ml、4mg/ml、2mg/ml、1mg/ml、0.5mg/ml、0.25mg/ml、0.125mg/ml、Omg/ml）,将培养至第二代的兔角膜上皮细胞分别接种在铺有以上胶泥的细胞培养板底部,在显微镜下观察角膜上皮细胞的生长密度,结合CCK-8检测含不同浓度新型羊膜粉的AM-FS胶泥对细胞增殖的影响,筛选出AM-FS胶泥中羊膜粉的适宜添加浓度。动物实验:将在1mol/ml氢氧化钠溶液中浸泡过的圆形滤纸片（直径为15mm）置于兔角膜表面60s,随后立即用大量生理盐水迅速冲洗受损角膜及周围组织,制作兔重度眼表碱烧伤模型,按照治疗方式不同将模型动物随机分为四组（AM-FS胶泥组、新鲜羊膜移植组、纤维蛋白胶（FS）组、实验对照组）每组8只,术后7d、14d、21d、28d分别行裂隙灯显微镜检查、荧光素钠角膜染色观察角膜修复情况,第28d取材、固定角膜分别行HE染色,免疫组织化学法检测mcp-1、VEGF在角膜中的表达情况。[结 果]检测并比较新型羊膜粉及新鲜羊膜中bFGF、TGF β、NGF R、HGF、EGF的表达,结果显示:新型羊膜粉中NGF R的表达量低于新鲜羊膜,bFGF、HGF、EGF在新型羊膜粉中的表达量均高于新鲜羊膜,差异均具有统计学意义（adj.P.Val<0.05且logFC>0.263）,TGF β在新型羊膜粉的表达量与新鲜羊膜组相比差异无统计学意义（logFC<0.263）;将新型羊膜粉分别于室温、4℃、-20℃下保存,分别检测不同时间点各组生长因子表达量的变化,结果显示:10d、20d时各组新型羊膜粉中HGF、bFGF、EGF的表达均不低于新鲜羊膜组,且HGF、NGF R、bFGF、EGF在室温组的表达均不低于4℃组和-20℃组;30d时除HGF、bFGF外其余因子在各组的表达较新鲜羊膜组均下降,室温组中HGF、bFGF、EGF的表达均不低于4℃组和-20℃组,推测新型羊膜粉性质稳定可室温保存。体外细胞实验结果:培养72h后显微镜下观察到新型羊膜粉浓度为65mg/ml、32mg/ml、16mg/ml、8mg/ml、4mg/ml、2mg/ml 的 AM-FS 胶泥未见细胞生长;从1mg/ml浓度组观察到角膜上皮细胞的生长,1mg/ml到0.5mg/ml浓度组角膜上皮细胞增长最显着。CCK-8检测结果:吸光度（A）值随新型羊膜粉浓度降低而升高,新型羊膜粉浓度在0.25mg/ml处达到最高,但结果与0.5mg/ml组差异无统计学意义（P>0.05）,筛选新型羊膜粉浓度为0.25mg/ml的AM-FS胶泥进行动物实验。动物实验结果:AM-FS胶泥组在前2周降低角膜混浊度效果不明显（与实验对照组相比P>0.05）,其降低角膜混浊度的作用在后2周才出现（与实验对照组相比P<0.05）,第28d AM-FS胶泥组角膜混浊度与新鲜羊膜移植组差异无统计学意义（P<0.05）,FS组在各时间点减少碱烧伤后角膜混浊度的效果不显着（与实验对照组相比P>0.05）;各组兔碱烧伤后角膜新生血管面积均随时间而增加,但AM-FS胶泥组、新鲜羊膜移植组、FS组角膜新生血管面积在各时点均小于实验对照组（P<0.05）,虽然新鲜羊膜移植组角膜新生血管面积在第7d、21d、28d均小于AM-FS胶泥组（P<0.05）,但两组间新生血管面积各时间点的差值均较小（分别为0.34、0.38、0.88）。HE染色结果:AM-FS组和新鲜羊膜移植组的角膜结构完整,上皮排列趋于正常组织,角膜愈合优于FS组和实验对照组。免疫组化结果:VEGF在新鲜羊膜移植组的阳性表达较其余三组弱,AM-FS组和新鲜羊膜移植组中mcp-1的阳性表达程度相似。[结 论]37℃恒温风干新鲜羊膜并经液氮预冷后研磨制备的新型羊膜粉中活性细胞因子表达含量高,性质稳定可室温保存,其与纤维蛋白胶融合制备的AM-FS胶泥在兔眼表碱烧伤治疗中具有促进角膜上皮修复、抑制炎症及角膜新生血管生成的作用,并且使用便捷,为新型羊膜制品的研发提供新思路。
徐佩芳[2]（2020）在《眼睑缺损修复中组织工程睑板替代材料的应用研究》文中研究说明第一部分新型支化聚乙烯多孔支架材料的制备及其生物相容性评估目的利用新型支化聚乙烯弹性体作为材料本体构建可用于软组织修复的组织工程多孔支架。探索制备聚乙烯多孔支架的可行性,获得具有合适孔隙率,孔连通性及孔径大小的支架。观察材料本体及多孔支架的理化特征,评估材料体外及体内生物相容性。以期构建出具有良好生物相容性,能快速被组织整合的多孔支架材料,为后续作为睑板替代材料提供可能。方法选用明胶粒子作为致孔剂制备支化聚乙烯支架。扫描电镜观察本体材料及支架的微观结构,排乙醇法测定支架孔隙率。浸提液法检测材料对NIH/3T3成纤维细胞和人静脉内皮细胞的毒性,FDA活细胞染色观察细胞在材料表面黏附与增殖,共聚焦显微镜观察三维培养下人静脉内皮细胞在支架上的细胞行为。大鼠背部皮下植入支架,通过组织学及分子生物学以评估材料体内宿主组织反应。结果支化聚乙烯弹性体结构疏松,表面疏水。以孔径280-480?m的明胶颗粒为模板可以制备结构稳定,孔隙率可达90%,且孔连通性良好的多孔支架。CCK-8试验检测支化聚乙烯浸提液对NIH/3T3成纤维和人静脉内皮细胞毒性,各时间点细胞增殖与空白对照无显着差异（P>0.05）。人静脉内皮细胞在材料表面黏附与增殖优于NIH/3T3成纤维细胞。人静脉内皮细胞在支架上三维培养7天后,支架被完全内皮细胞化。植入大鼠背部后,支架只引起短暂且轻微的炎症反应,快速的血管化,以及适量的胶原沉积。分子生物学结果显示炎症因子表达处于较低水平,而血管化和胶原沉积相关基因表达上调,与组织学结果基本一致。结论支化聚乙烯弹性体具有良好的可加工性和成膜性能。明胶模板致孔剂法可适用于制备孔隙率高,孔径适度,孔连通性良好的多孔支架。浸提液实验及细胞直接接触实验提示材料在体外没有明显细胞毒性。多孔支架体内植入后引起轻微的炎症反应,并能被快速的纤维血管化,材料与宿主组织整合良好。第二部分新型支化聚乙烯睑板材料应用于眼睑损伤修复的研究目的评估天然睑板及支化聚乙烯多孔支架的力学性能及微纳结构。分析评价其作为睑板替代材料在原位植入兔眼睑缺损中的修复效果,为支化聚乙烯支架材料在组织工程中的应用提供新的思路和实验基础。方法获取兔新鲜睑板组织,观察其力学性能,组织学组成及生物学功能。分析支化聚乙烯支架和Medpor对照材料的力学性能和微纳结构,评估其与天然睑板的性能及结构仿生可行性。建立兔睑板缺损动物模型,原位植入支化聚乙烯支架及Medpor材料,通过病理组织切片H&E和Masson染色观察炎症反应,支架位置,组织整合等情况,综合评估材料与眼睑组织的相互作用。结果兔睑板由致密纤维结缔组织包裹规律排列的睑板腺组成,平均拉伸模量为0.92±0.1 MPa,断裂伸长率为50.8±10.4%。支化聚乙烯支架及Medpor植片的弹性模量及断裂伸长率为分别0.8±0.1MPa,76.2±2.8%,和30.2±4.5Mpa,7.0±1.1%。成功构建兔睑板缺损模型,术后4周,如果没有进行睑板重建,睑板表现为疤痕收缩,形成眼睑切迹。植入支化聚乙烯支架组修复效果优于Medpor植入组。经H&E染色可见,支化聚乙烯支架内部被纤维血管组织整合,材料位置稳定,而Medpor内部组织浸润不足,部分出现移位及暴露。Masson染色结果显示,支化聚乙烯支架和Medpor支架引起的纤维包裹厚度为134.4±24.9?m和271.6±46.5?m。结论支化聚乙烯多孔支架具有与天然睑板相似的力学性能,相比于Medpor材料在植入眼睑后能更快速被纤维血管化,与宿主整合,具有更好的稳定性,且材料刚度与组织相近,可以支持和适应眼睑形态。本研究尝试构建结构和力学性能与组织匹配的替代材料,为眼睑重建提供了新的材料来源和思路。第三部分仿睑板-结膜双层复合支架的制备及其对眼睑损伤修复的研究目的基于睑板-结膜组织的组成及结构,探索构建可以同时重建睑板和结膜组织的双层复合材料。微观层面分析双层支架材料对细胞行为的影响,进一步原位评估该材料对眼睑后层缺损修复效果。方法通过将软材料胶原/壳聚糖（Col/CS）复合至硬材料聚富马酸丙二醇酯/甲基丙烯酸羟乙酯（PPF-HEMA）获得双层复合支架。扫描电镜观察支架形态及孔结构,排乙醇法测量支架孔隙率,通用力学试验机测试材料的压缩及拉伸性能,根据支架在磷酸盐缓冲液中的质量损失分析体外降解性能。观察人结膜上皮细胞（Cj ECs）在支架中的细胞黏附,增殖活性,迁移行为等。构建兔眼睑后层缺损模型,原位植入评估双层支架的修复效果。结果成功构建了PPF-COL双层复合支架,韧性的PPF-HEMA支架做为骨架材料,支撑柔性Col/CS内衬,模拟眼睑后层睑板-结膜双层结构。双层支架具有高孔隙率,约90%,表层Col/CS及底层PPF-HEMA孔径分别约为95?m和235?m,体外降解稳定,降解12周时,原有宏观及微观结构保持良好。Cj ECs细胞在双层支架中增殖明显高于单纯PPF-HEMA支架,且趋向于向Col/CS表面迁移,汇合。在眼睑重建模型中,复合一定厚度的Col/CS的双层支架可以明显促进结膜缺损闭合,再上皮化,再生组织中结膜上皮特异性染色CK4和MUC5AC阳性。结论Col/CS与PPF-HEMA骨架复合后,双层支架在体外表现出更好的细胞黏附和增殖能力。在兔眼睑后层缺损修复中,具有较好的重建效果,同时支持功能性结膜组织再生。本研究结果为组织工程眼睑缺损重建的理想替代物的设计和构建提供了新的概念。
郭庆[3]（2017）在《羊膜对角膜损伤的治疗作用及其机理研究》文中研究说明眼表疾病是眼科的常见病、多发病,且复发率高,是眼科主要致盲疾病之一。对于各种眼表疾病所致角膜上皮缺损的治疗,目前以眼表面重建术效果最好,常采用的方法是自体或异体角膜移植术。但自体角膜缘取材有限,并有造成健眼角膜缘干细胞缺乏的风险。异体角膜要求新鲜,且存在来源不足、排斥反应等问题。由于羊膜有其特有的结构特点和促进组织修复的生物学特性,研究者们开始转向以羊膜为原材料治疗眼表疾病的研究中。在对羊膜移植的研究基础上,羊膜的研磨提取液—羊膜匀浆液保留了羊膜中的有效生物成分,在治疗眼表疾病方面取得了一定的进展,是一种较新的尝试。随着生物技术和其他相关技术的发展,以羊膜上皮细胞作为“种子细胞”构建组织工程角膜上皮,在眼表疾病治疗中亦显示出良好的发展前景。本文以羊膜为原材料,从动物实验、临床研究、细胞培养三个层面,研究羊膜移植片、羊膜匀浆液、羊膜上皮细胞对角膜上皮缺损的治疗作用及作用机制,为解决眼表重建材料缺乏及严重眼表疾病的治疗提供新的方法和新的理论依据。首先建立兔角膜上皮损伤的动物模型,行以羊膜移植术,以观察羊膜对动物角膜伤口愈合的作用。结果发现,羊膜移植组与对照组比较,角膜上皮愈合加快,显微形态学观察显示,实验组细胞排列水平、细胞形态、炎症细胞数等方面较对照组均明显改善。其次,在动物实验的基础上,对不同病因所致的眼表上皮缺损患者24人（25眼）,行以羊膜移植术,该临床研究发现:25只眼中21只眼眼表面得以重建,视力有不同程度的提高。再生的角膜上皮透明,结膜组织稳定、无感染。平均观察28.3周,所有21只眼无复发,另外3只眼因并发症致手术失败。再次,以上皮细胞缺损的兔角膜作为研究对象,观察不同浓度羊膜匀浆液对角膜上皮细胞增殖的作用。结果发现,羊膜匀浆液对兔角膜上皮细胞增殖和修复具有明显的促进作用,且这种促进作用在一定范围内随浓度增加而增强,即角膜上皮细胞的增殖率对羊膜匀浆液具有浓度依从性。羊膜匀浆组与羊膜移植组比较作用效果相同,但可避免手术并发症。最后,进行羊膜及角膜上皮细胞培养以及二者共同培养的细胞学研究。结果显示:羊膜上皮细胞在原代培养2 h后开始贴壁生长。细胞呈多角形、不规则形,排列呈铺路石样。体外可连续传45代,CK3、CK18、CK19呈阳性表达。流式细胞仪检测CK3、CK18、CK19表达率分别为40.84±3%,47.51±2%和32.41±3%。角膜上皮细胞在培养的第3天时开始爬出,呈多角形,排列均匀。经诱导培养后的羊膜上皮细胞呈多角形、扁平状,细胞体积增大。流式细胞学检测CK3表达率为76.40±0.3%,与诱导前相比有显着差异（P<0.05）,具有统计学意义。综上所述,本文针对羊膜进行了动物实验、临床研究、细胞培养三个层面的研究工作,实验和临床研究均证明了羊膜对角膜上皮缺损的修复具有促进作用,为解决眼表重建材料缺乏及严重眼表疾病的治疗提供了新的途径和方法。
唐国芬,董微莉,王东华,王跃丽[4]（2010）在《新鲜人羊膜移植在翼状胬肉治疗中的应用》文中研究说明背景:翼状胬肉在北方的发病率较高,使用传统手术方法切除后角膜易出现散光,复发率也较高,患者往往需要行二次甚至多次手术处理,痛苦较大。目的:观察新鲜羊膜移植治疗翼状胬肉中的临床效果。方法:选择原发性翼状胬肉患者48例58眼,根据患者自愿选择分为新鲜人羊膜移植组29眼与单纯性切除组29眼,在显微镜下分别行翼状胬肉切除联合新鲜羊膜移植、单纯性翼状胬肉切除,术后随访6～12个月,观察两组胬肉复发及眼表修复情况。结果与结论:末次随访时,新鲜人羊膜移植组29眼中2眼复发,27眼治愈,复发率为6%。单纯性切除组29眼中4眼复发,25眼治愈,复发率为13%。两组复发率比较差异有显着性意义（P<0.05）。说明新鲜人羊膜移植可明显降低翼状胬肉术后复发率,是一种有效方法,其远期疗效有待进一步验证。
徐洪超,管学刚,孔庆兰[5]（2009）在《自体角膜缘干细胞与人羊膜移植治疗翼状胬肉效果比较》文中进行了进一步梳理目的观察自体角膜缘干细胞移植与羊膜移植治疗翼状胬肉的临床效果。方法选择我院门诊治疗的翼状胬肉病人100例（127眼）,随机分为2组。A组64例（84眼）采用自体角膜缘干细胞移植治疗,B组36例（43眼）采用人羊膜移植治疗。随诊观察2年。结果A组治愈79眼（94.05%）,复发5眼（5.95%）;B组治愈39眼（90.70%）,复发4眼（9.30%）,两组比较差异无统计学意义（χ2=0.11,P>0.05）。结论自体角膜缘干细胞移植与人羊膜移植治疗翼状胬肉均效果良好,复发率低。
唐勇华,卢银波,刘生荣,秦满庆,韦丽娇[6]（2008）在《三种翼状胬肉手术的临床效果比较》文中研究说明[目的]观察自体角膜缘干细胞移植术、新鲜羊膜移植术及自体角膜缘干细胞移植联合新鲜羊膜移植术治疗翼状胬肉的临床疗效。[方法]对132例（178眼）翼状胬肉随机分为A、B、C三组:A组50例（67眼）行自体角膜缘干细胞移植;B组40例（51眼）行新鲜羊膜移植;C组42例（60眼）行自体角膜缘干细胞移植联合新鲜羊膜移植,术后随访2年,观察三组患者疗效及胬肉复发情况。[结果]A组治愈率为86.7%,B组治愈率为70.6%,C组治愈率为88.3%,A、C两组疗效均优于B组（P<0.05或P<0.01）,A、C两组疗效比较无统计学差异（P>0.05）;A、C两组复发率显着低于B组（P<0.05）。[结论]角膜缘干细胞移植及自体角膜缘干细胞移植联合新鲜羊膜移植术式在临床疗效及降低复发率上明显优于新鲜羊膜移植术,是处理翼状胬肉较好的术式。
段直光,李汉钊,陶涛,许寿芬,何亚妮,李明芝[7]（2007）在《新鲜羊膜移植治疗眼表泪液病162例临床分析》文中提出目的:探讨新鲜羊膜移植重建眼表的可行性和治疗眼表泪液病的临床效果及羊膜上皮在眼表的存活时间。方法:对162例190眼眼表疾病患者进行羊膜移植术,重建正常眼表结构,并在术后3月、6月对部分患眼羊膜植片进行组织细胞学和印迹细胞学检查,随访3至18月。结果:175眼（占92.11%）羊膜植片生长良好,15眼复发（复发率7.89%）。细胞学检查表明:羊膜植片能够在免疫条件下成活后适应生长。结论:羊膜作为一种生物膜能修复眼表缺损区基质,使眼表缺损区迅速上皮化修复,成为眼表重建术中生物材料应用的一项革命性改进,提高了广大眼表疾病患者的治愈率,具有良好的临床应用前景和推广价值。
杨丽霞,余鹰翔,陈国苍,郑祥榕[8]（2007）在《深低温+100%甘油+RPMI1640合成细胞培养液保存羊膜联合角膜缘干细胞移植在眼表重建中的应用》文中提出目的:评价深低温+100%甘油+RPMI1640合成细胞培养液保存羊膜联合角膜缘干细胞移植在重建眼表结构中的治疗效果。方法:①实验对象:选取解放军南京军区福州总医院眼科中心2000～2006年收治的严重眼表烧伤患者29例34眼。实验经医学伦理委员会批准,剖腹产孕妇的胎盘由本院妇产科提供,孕妇均签署知情同意书。离体6h以内的同种异体新鲜角膜由福建省红十字会提供。②实验方法:钝性分离羊膜与绒毛膜,将羊膜上皮面朝上平铺于去除胶面的眼科手术薄膜纸片上,剪成3cm×4cm大小,置于100%甘油+RPMI1640合成细胞培养液各5mL的无菌小瓶中,-80℃冷藏备用。在供体眼球角膜缘前1mm处透明角膜上、角膜缘后2mm处巩膜上作适当深度的环形划界,然后剖出带有浅层基质的角膜缘上皮移植片备用。严重眼表烧伤组织,将备好的羊膜植片上皮面朝上平铺于眼表面,依结膜缺损区大小修剪,缝合固定于近角膜缘的浅层巩膜上,使羊膜紧贴于角膜表面,然后将羊膜边缘与球结膜对位缝合。再将备好的角膜缘上皮移植片与植床角膜缘对位固定缝合。此外,4眼伴轻度眼睑闭合不全者同时行眼睑缘粘连性缝合。结果:严重眼表烧伤患者29例34眼中,除眼睑缘粘连性缝合的4眼外,余30眼（88.24%）术后7～14d角膜水肿消退,14～21d上皮修复角膜全表面,结膜表面光滑,无感染发生;术后3～6个月角膜新生血管明显减少,角膜透明度改善,视力提高3～5行;经过22.8个月随访,眼表面稳定。睑缘粘连性缝合的4眼（11.76%）发生羊膜植片急性排斥反应,羊膜融解,改行深板层角膜移植,2个月后观察眼表亦光滑,无睑球粘连发生。结论:深低温+100%甘油+RPMI1640合成细胞培养液保存羊膜联合角膜缘干细胞移植手术,既发挥了羊膜的生物学特性,又提供了角膜缘活性细胞,能快速、稳定促进角膜更新机制的恢复,加速角膜表面重新上皮化,是治疗严重眼表烧伤有效、可行的手术方式。
唐国芬,阎玉梅,王跃丽,崔秀成,张媛梅,付笑笑,邓志鸿[9]（2007）在《新鲜与保存人羊膜移植在眼表重建中的效果比较》文中认为目的:新鲜羊膜移植已经在严重疾患的眼表重建中取得了良好的效果,但存在手术时间与材料来源是否能吻合的问题,比较新鲜与保存人羊膜移植在眼表重建中的疗效,以期为重建正常眼表结构提供有效措施。方法:选择2004-01/2005-12承德医学院附属医院眼科收治的严重眼表疾病患者36例（43眼）,患者均知情同意。将36例患者的43眼按随机数字表法分为两组,即新鲜人羊膜移植组（23眼）和保存人羊膜移植组（20眼）。术后定期随访,第1周每日检查,其后1次/周,直至羊膜存活1个月以上停止随访。每次均在裂隙灯下观察羊膜植片成活情况,观察角膜、结膜上皮化情况,新生血管生长、视力以及并发症等。结果:36例患者43眼全部进入结果分析,无脱落。①36例患者43眼随访2-8个月,其中<2个月8眼,2-5个月20眼,6-8个月15眼。②新鲜人羊膜移植组、保存人羊膜移植组患者术眼视力提高率分别为83%,90%,两组差异无显着性意义（P>0.05）。③新鲜人羊膜移植组、保存人羊膜移植组患者术眼羊膜成活率分别为91%,95%,两组差异无显着性意义（P>0.05）。④新鲜人羊膜移植组23眼中,术后两三拆线后21眼（占91.3%）充血消退,2眼（占8.7%）术后4周充血消退;保存人羊膜移植组20眼中,术后2周拆线后19眼（95%）充血消退,1眼（5%）术后4周充血消退,两组差异无显着性意义（P>0.05）。结论:在眼表修复与重建过程中,羊膜移植能有效改善严重眼表疾病患者眼表基底,重建上皮,其临床疗效与羊膜材料是新鲜或保存人羊膜无直接关系,二者预后基本一致。
庆惠玲[10]（2007）在《体外培养角膜缘上皮细胞重建眼表的实验研究》文中研究表明角膜感染、外伤、热及化学性烧伤、先天性异常、反复复发的翼状胬肉和肿瘤等疾病严重损伤眼表组织，造成视力下降，甚至致盲。角膜盲的患者在盲病人中占相当比例，由于眼表疾病以及角膜缘干细胞缺失所导致的角膜盲欠缺有效治疗手段，故对其治疗一直是步履蹒跚。粘膜或结膜移植眼表重建手术的临床效果较差，因为粘膜和结膜与角膜上皮表型不同而不能恢复眼表正常的形态与功能，最终导致新生血管化。同种异体板层角膜移植供体来源匮乏，冷冻保存的植片由于角膜缘干细胞的失活不能改善重建正常的眼表。随着对角膜缘干细胞在维持眼表中的重要作用的不断认识，角膜缘干细胞移植成为目前的研究热点。1998年12月美国科学家在《science》上报导，成功地在体外培养和扩增了人体胚胎干细胞，这一研究为利用干细胞治疗疾病提供了理论依据。一年之后，美国科学家发现小鼠肌肉组织的成体干细胞可以“横向分化”为血液细胞，这一发现陆续被世界各国科学家所证实。随着研究的深入，人们还发现人类的成体干细胞同样具有“横向分化”的功能，这也表明人类有望利用患者自身健康组织的干细胞，定向诱导分化成有功能的细胞用于治疗疾病。随着干细胞研究的深入，组织工程学也应运而生，组织工程技术的兴起为解决眼表重建的难题带来了希望。组织工程技术的基本方法是取少量自体健康角膜缘组织，体外培养扩增后种植于一种生物相容性良好的载体上，组成复合角膜上皮植片后移植到患侧眼表。其优点在于：取材量少、健眼损伤小、解决了供体来源问题、不存在免疫排斥反应。角膜缘干细胞经体外培养后其抗原性会有所降低，这就更有利于异体移植。因此，角膜缘干细胞培养后移植解决了干细胞来源不足的问题，对异体角膜缘干细胞的体外培养是目前研究的重点，是治疗眼表疾病最有前途的治疗方法。目前角膜缘干细胞理想的培养体系还处于探索研究阶段，正确获取培养用角膜缘组织是体外成功培养角膜缘干细胞的首要因素，但由于角膜缘干细胞缺乏明确的阳性标志，对其的研究一直在进行中。还有角膜缘干细胞体外培养时，细胞增殖、分化等过程的调节受许多因素制约，其中许多环节人们还知之甚少。如能在这些方面有所突破，有望产生巨大的社会效益和经济效益，并为数以十万计的角膜盲患者带来福音。基于上述，本实验研究利用组织工程学、细胞生物学和干细胞与干细胞工程学的基本原理与方法，试图在体外成功培养角膜缘干细胞、构建组织工程化角膜上皮，并将组织工程化角膜上皮移植于动物模型，以达到重建眼表、恢复角膜表面的光滑和透明，恢复眼表面较为正常的解剖结构和功能，为进一步组织工程化眼表重建奠定理论和实验基础。在本研究中应用体外组织培养方法，对兔角膜上皮前体细胞或角膜缘干细胞（祖细胞）存在的确切部位和生理特性、在完整羊膜和去上皮层羊膜为载体培养的生物学特性和以去上皮层羊膜为载体培养后自体及异体移植治疗全角膜缘干细胞缺损以及临床应用等情况进行了实验，主要方法和结果概括如下：一．应用体外组织培养方法，以兔角结膜分界线（Cornea-Conjuctiva Line CCL）为基准，分成8个定位区带，并分别以12点、3点、6点、9点为中心，取材进行体外培养。逐日观察细胞成膜状态，测量成膜面积并进行统计学分析。结果显示：1．角膜缘不同区域的上皮组织在细胞生长时间、成膜时间、成膜速率以及成膜类型方面具有明显差异（P＜0.01），角膜缘附近的角膜上皮细胞生长最快、出膜最早、膜状态最好。2．CCL内各区组培养后均无成纤维细胞出现；而CCL外各区组培养后可见成纤维细胞，距CCL线越远成纤维细胞数量越多。3．水平方位与垂直方位即12点位、6点位、3点位和9点位的角膜上皮前体细胞成膜形态与成膜规律的比较，发现二者不存在明显差异（p＞0.05）。4．角膜缘附近的角膜上皮细胞体外培养形成的膜都是完整、均质、透明的，当膜在其增长过程中，可将扩展范围内的成纤维细胞化解。提示：1．角膜缘不同定位区组织细胞形成膜的特性不同，含有干细胞的角膜缘附近的角膜上皮细胞生长最快、出膜最早、膜状态最好。2．角膜缘部栅栏组织的丰富程度与角膜上皮前体细胞的数量及功能未必存在一致关系。3．角膜缘干细胞形成的膜有保持其透明性及排它性的生理特性。4．进行角膜缘干细胞体外培养，从CCL附近取材较为适宜。二．对兔角巩膜缘不同定位区的角结膜上皮细胞进行体外组织培养，探讨了角膜缘干细胞的生理特性。结果显示：1．当角膜缘上皮细胞形成的膜片相互融合时，他们之间是兼容连接，最终形成的膜片之间无连接的痕迹。2．当角膜缘上皮细胞形成的膜片与结膜上皮细胞形成的成纤维细胞融合时出现相互竞争现象。3．角膜缘存在有角膜缘干细胞，角膜缘上皮细胞形成的膜有保持其透明性及排它性的生理表现。提示：1．角膜缘上皮细胞和结膜上皮细胞存在相互竞争机制，为角膜缘干细胞缺乏症引起的角膜结膜化提供了必要的实验基础。2．角膜缘存在有角膜缘干细胞，角膜缘干细胞对维持角膜的透明性和正常生理功能有重要意义。三．采用组织块培养法，将角膜缘及角膜中心组织块分别种植于完整羊膜和去上皮层羊膜上进行培养，观察并比较在完整羊膜、去上皮层羊膜为载体培养兔角膜上皮细胞的生物学特性。结果显示：1．角膜上皮细胞在去上皮层羊膜上培养成膜速率与成膜面积方面均快于在完整羊膜上培养，去上皮层羊膜更利于角膜上皮细胞的生长。2．角膜上皮细胞在完整羊膜上培养，当膜在其增长过程中，需将扩展范围内的羊膜上皮细胞推开，膜才能继续增长。提示：1．不同性质羊膜为载体对角膜上皮细胞的生物学特性有一定的影响，去上皮层羊膜更利于角膜上皮细胞的生长，可作为一个良好的载体用于移植。2．角膜上皮细胞具有排它性的生理特性，对维持角膜的透明性和正常生理功能有重要意义。四．制作兔眼（以右眼为实验眼）角膜缘干细胞完全缺损模型3个月，将实验动物随机分为两组即实验组和对照组。实验组取对侧眼角膜缘组织以去除上皮细胞的羊膜基底膜为载体制成组织工程角膜上皮，约培养后12天行角膜缘干细胞羊膜移植术；对照组行单纯羊膜移植术（仅将刮除上皮的羊膜），术后观察3个月。以角膜上皮染色，角膜浑浊和新生血管三项指标进行临床疗效评定，通过病理检查评估术后角膜上皮修复情况，印迹细胞学检查移植前后角膜上皮的细胞表型。结果显示：1．体外培养的兔角膜缘干细胞可在羊膜上粘附生长并增殖。2．自体角膜缘干细胞移植术后兔角膜缘轻度充血、角膜上皮逐渐愈合，透明度提高，基质细胞浸润减轻，新生血管减退或消失。印迹细胞学检查显示：移植前角膜上皮细胞PAS（+），而移植后角膜上皮细胞PAS（-）；组织病理学显示：移植前角膜上皮大部分缺损，移植后角膜上皮为角膜上皮结构。提示：以羊膜为载体培养角膜缘上皮细胞可体外重建组织工程角膜上皮组织，自体角膜缘干细胞羊膜移植术可修复角膜缘干细胞缺损。五．制作兔眼角膜缘干细胞完全缺损3个月的模型，将实验动物随机分为两组即自体移植组和异体移植组。自体移植组取对侧眼角膜缘组织，异体移植组取健康的兔眼角膜缘组织，均以去除上皮细胞的羊膜基底膜为载体，培养12天后行角膜缘干细胞羊膜移植术。术后观察3个月，以角膜上皮染色、角膜浑浊和新生血管三项指标进行临床疗效评定，通过病理检查评估术后角膜上皮修复情况，印迹细胞学检查移植前后角膜上皮的细胞表型。结果显示：体外培养的兔角膜缘干细胞可在羊膜上粘附生长并增殖，体外培养12天可形成复层。自体移植组和部分异体移植组术后角膜上皮逐渐愈合，透明度提高，基质细胞浸润减轻，新生血管减退或消失。印迹细胞学检查显示：移植前角膜上皮细胞PAS（+），而移植后转为（-）；组织病理学显示：移植前角膜上皮大部分缺损，移植后呈现角膜上皮结构。部分异体移植组术后出现了免疫排斥反应。提示：自体角膜缘干细胞羊膜移植术可重建眼表；免疫排斥反应仍是异体角膜缘干细胞羊膜移植术失败的主要原因。六．我们选择两例眼烧伤后重度睑球粘连患者，观察以去除上皮细胞的人羊膜基底膜为载体，，自体血清培养异体角膜缘上皮细胞后移植治疗眼烧伤后重度睑球粘连，术后观察结膜囊情况、眼球活动、角膜植片免疫排斥反应情况和转归情况。探讨以人自体血清、人羊膜为基底膜培养角膜缘上皮细胞后移植治疗眼烧伤后重度睑球粘连的眼表重建效果。结果显示：术后患者自觉症状轻，视力有所提高，角膜缘干细胞移植片紧密贴附，角膜上皮得到修复，浅层新生血管减少，睑球粘连得到松解。提示：自体血清培养异体角膜缘上皮细胞后移植是治疗眼烧伤后重度睑球粘连的有效方法。本研究通过体外培养角膜缘上皮细胞生理特性，进一步证实了角膜干细胞存在于角膜缘的观点，验证了角膜缘干细胞对维持角膜的透明性和正常生理功能有重要意义的说法。通过观察并比较在完整羊膜与去上皮细胞层羊膜为载体培养兔角膜缘上皮细胞的生物学特性，表明去上皮细胞层羊膜可作为一个良好的载体用于移植。并以去上皮细胞羊膜作为载体，经培养后用于移植于全角膜缘干细胞缺损模型，可达到重建眼表。通过以去上皮细胞羊膜作为载体，人自体血清培养异体角膜缘上皮细胞后移植是治疗眼烧伤后重度睑球粘连的有效方法，避免了鼠源性3T3细胞饲养层和胎牛血清传播异种动物的风险，并降低了术后的免疫排斥反应，为眼表重建术提供另一研究新方向。
二、新鲜人羊膜移植在重建眼表结构中的临床应用（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、新鲜人羊膜移植在重建眼表结构中的临床应用（论文提纲范文）
（1）羊膜-纤维蛋白胶泥的制备及其治疗兔重度眼表碱烧伤的实验研究（论文提纲范文）
| 缩略词表 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 羊膜在眼表疾病治疗的研宄进展 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间获得的学术成果 |
| 致谢 |
（2）眼睑缺损修复中组织工程睑板替代材料的应用研究（论文提纲范文）
| 致谢 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 缩略词 |
| 绪论 |
| 1 眼睑缺损和重建 |
| 1.1 眼睑的生物学特征 |
| 1.2 眼睑缺损的手术重建 |
| 2 眼睑重建替代材料的选择 |
| 2.1 自体组织材料 |
| 2.2 异体/异种组织材料 |
| 2.3 人工合成材料 |
| 3 组织工程在眼睑重建中的应用 |
| 3.1 组织工程睑板替代材料性能要求 |
| 3.2 材料介导宿主免疫反应 |
| 4 总结 |
| 参考文献 |
| 第一部分 新型支化聚乙烯多孔支架材料的制备及其生物相容性评估 |
| 1 引言 |
| 2 材料和方法 |
| 2.1 材料与试剂 |
| 2.2 实验仪器 |
| 2.3 实验方法 |
| 3 结果 |
| 3.1 B-PE材料理化特征和形貌结构 |
| 3.2 B-PE多孔支架形貌和结构 |
| 3.3 细胞毒性 |
| 3.4 细胞黏附与增殖 |
| 3.5 B-PE支架表面内皮细胞化 |
| 3.6 B-PE支架体内生物相容性组织学评估 |
| 3.7 B-PE多孔支架背埋相关基因表达 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 参考文献 |
| 第二部分 新型支化聚乙烯睑板材料应用于眼睑损伤修复的研究 |
| 1 引言 |
| 2 材料和方法 |
| 2.1 材料与试剂 |
| 2.2 实验仪器 |
| 2.3 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 新鲜兔眼睑组织学与生物力学特征 |
| 3.2 B-PE多孔支架力学性能和微纳结构表征 |
| 3.3 兔睑板缺损修复大体观察 |
| 3.4 眼睑组织学修复效果评价 |
| 3.5 睑板缺损处纤维包裹评估 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 参考文献 |
| 第三部分 仿结膜-睑板双层复合支架的制备及其对眼睑损伤修复的研究 |
| 1 引言 |
| 2 材料和方法 |
| 2.1 材料与试剂 |
| 2.2 实验仪器 |
| 2.3 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 双层支架宏观及微观形貌 |
| 3.2 双层支架力学性能 |
| 3.3 双层支架体外降解 |
| 3.4 细胞在支架中的增殖实验 |
| 3.5 CjECs在支架中形态和分布 |
| 3.6 双层支架在睑板-结膜缺损重建中的作用 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 生物材料在眼表微环境重建中的应用 |
| 参考文献 |
| 作者简历及在读期间所取得的科研成果 |
（3）羊膜对角膜损伤的治疗作用及其机理研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第1章 绪论 |
| 1.1 课题来源 |
| 1.2 课题背景及研究的目的和意义 |
| 1.3 羊膜的特性 |
| 1.3.1 羊膜的组织学特性 |
| 1.3.2 羊膜的免疫学特性 |
| 1.3.3 羊膜的生物学特性 |
| 1.4 羊膜的研究现状及进展 |
| 1.4.1 羊膜的历史应用 |
| 1.4.2 羊膜的基础研究 |
| 1.5 羊膜在眼科的应用及研究进展 |
| 1.5.1 修复角膜上皮缺损 |
| 1.5.2 修复结膜上皮缺损及异常增生 |
| 1.5.3 治疗角巩膜溃疡及穿孔 |
| 1.5.4 角膜移植的辅助性治疗 |
| 1.5.5 眼部复杂化学烧伤的治疗 |
| 1.5.6 青光眼手术中的应用 |
| 1.5.7 屈光手术中的应用 |
| 1.5.8 其他眼病的治疗 |
| 1.6 羊膜在组织工程学中的应用 |
| 1.7 主要研究内容 |
| 第2章 实验材料及方法 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 羊膜植片的筛选 |
| 2.1.2 实验动物的筛选 |
| 2.1.3 临床治疗病人筛选 |
| 2.1.4 实验试剂 |
| 2.1.5 手术器械 |
| 2.1.6 实验仪器 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 羊膜植片的制备及保存 |
| 2.2.2 羊膜匀浆的制备及保存 |
| 2.2.3 羊膜匀浆蛋白含量测定及实验溶液制备 |
| 2.2.4 病理标本的取材制备 |
| 2.2.5 羊膜上皮细胞原代及传代培养 |
| 2.2.6 羊膜上皮细胞的检测 |
| 2.2.7 角膜上皮细胞原代培养 |
| 2.2.8 羊膜上皮细胞与角膜上皮细胞共同培养 |
| 2.2.9 诱导后羊膜上皮细胞检测 |
| 2.3 统计学方法 |
| 第3章 羊膜移植治疗兔角膜损伤的研究 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 实验分组及动物模型的建立 |
| 3.2.1 实验分组 |
| 3.2.2 角膜损伤模型的建立 |
| 3.3 手术方式及观察指标 |
| 3.4 羊膜移植对兔角膜损伤愈合作用的比较分析 |
| 3.4.1 眼部炎症反应的比较分析 |
| 3.4.2 角膜上皮愈合时间的比较分析 |
| 3.5 羊膜移植术后显微形态学观察比较 |
| 3.5.1 光学显微镜观察比较 |
| 3.5.2 透射电镜观察比较 |
| 3.6 羊膜移植对角膜伤口愈合的影响 |
| 3.6.1 角膜伤口的愈合方式 |
| 3.6.2 生长因子、胶原纤维对角膜伤口愈合的影响 |
| 3.6.3 羊膜的作用及作用机理 |
| 3.6.4 实验结果及机理分析 |
| 3.7 本章小结 |
| 第4章 羊膜移植治疗人眼表疾病的临床研究 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 临床资料与手术方式 |
| 4.2.1 临床资料 |
| 4.2.2 羊膜植片的取材 |
| 4.2.3 手术方式 |
| 4.2.4 术后处理 |
| 4.3 临床愈后 |
| 4.4 典型病例报告 |
| 4.4.1 病例 1 |
| 4.4.2 病例 7 |
| 4.4.3 病例 19 |
| 4.5 羊膜移植的临床治疗作用及机理分析 |
| 4.5.1 临床愈后机理分析 |
| 4.5.2 手术适应症及手术方式的选择 |
| 4.5.3 术后并发症的预防和处理 |
| 4.5.4 影响愈后的相关因素分析 |
| 4.5.5 羊膜移植术临床应用的限制和不足 |
| 4.6 本章小结 |
| 第5章 羊膜匀浆液治疗兔角膜损伤的研究 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 羊膜匀浆液对兔角膜上皮细胞增殖作用的研究 |
| 5.2.1 实验分组及动物模型制备 |
| 5.2.2 角膜裸区面积的观察测量及细胞增殖率测定 |
| 5.2.3 各组生长速度的比较 |
| 5.3 羊膜匀浆液与羊膜移植对兔角膜损伤修复作用的比较研究 |
| 5.3.1 实验分组及动物模型制备 |
| 5.3.2 角膜裸区面积的观察测量及细胞增殖率测定 |
| 5.3.3 各组生长速度的比较 |
| 5.4 羊膜匀浆液的作用机理及应用前景分析 |
| 5.4.1 羊膜匀浆液的作用及作用机理 |
| 5.4.2 实验结果及机理分析 |
| 5.4.3 羊膜匀浆液在眼科疾病中的应用 |
| 5.4.4 羊膜匀浆液的应用优势及前景 |
| 5.5 本章小结 |
| 第6章 羊膜上皮细胞体外培养及诱导分化研究 |
| 6.1 引言 |
| 6.2 羊膜和角膜上皮细胞培养的形态变化及鉴定 |
| 6.2.1 羊膜上皮细胞形态变化 |
| 6.2.2 羊膜上皮细胞的鉴定 |
| 6.2.3 角膜上皮细胞的形态变化 |
| 6.2.4 角膜细胞诱导的羊膜上皮细胞形态变化及鉴定 |
| 6.3 羊膜和角膜上皮细胞培养的相关因素分析 |
| 6.3.1 实验材料选择相关性分析 |
| 6.3.2 羊膜上皮细胞的培养分析 |
| 6.3.3 羊膜上皮细胞的鉴定分析 |
| 6.3.4 角膜上皮细胞的培养分析 |
| 6.3.5 羊膜上皮细胞的诱导分化分析 |
| 6.3.6 本章实验的不足 |
| 6.4 本章小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文及其他成果 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（4）新鲜人羊膜移植在翼状胬肉治疗中的应用（论文提纲范文）
| 0 引言 |
| 1 对象和方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 参与者数量分析 |
| 2.2 随访结果 |
| 2.3不良反应 |
| 3 讨论 |
（5）自体角膜缘干细胞与人羊膜移植治疗翼状胬肉效果比较（论文提纲范文）
| 1 资料与方法 |
| 1.1 一般资料 |
| 1.2 手术方法 |
| 1.3 术后处理 |
| 1.4 疗效判断标准 |
| 2 结 果 |
| 3 讨 论 |
（7）新鲜羊膜移植治疗眼表泪液病162例临床分析（论文提纲范文）
| 1 临床资料 |
| 1.1 一般资料 |
| 1.2 新鲜羊膜制备 |
| 1.3 手术方法及术后处理 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
（8）深低温+100%甘油+RPMI1640合成细胞培养液保存羊膜联合角膜缘干细胞移植在眼表重建中的应用（论文提纲范文）
| 0 引言 |
| 1 对象和方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
（9）新鲜与保存人羊膜移植在眼表重建中的效果比较（论文提纲范文）
| 0 引言 |
| 1 对象和方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 参与者数量分析纳入43眼, 全部进入结果分析, 无脱落。 |
| 2.2 患者术后随访情况 |
| 2.3 两组患者术后视力情况比较 |
| 2.4 两组患者术后羊膜成活情况比较 |
| 2.5 两组患者术后眼部充血情况比较 |
| 3 讨论 |
（10）体外培养角膜缘上皮细胞重建眼表的实验研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 一角膜缘干细胞的研究 |
| 二.干细胞在治疗其他疾病的重要研究 |
| 三.问题和展望 |
| 第一部分 角膜上皮前体细胞在角膜缘的定位研究 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 第二部分 体外培养角膜缘上皮细胞生理特性的研究 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 第三部分 比较不同性质羊膜为载体培养角膜上皮细胞的生物学特性 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 第四部分 组织工程角膜上皮自体移植治疗兔角膜缘干细胞缺损的实验研究 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 第五部分 细胞培养后自体及异体移植治疗角膜缘干细胞缺损的实验研究 |
| 前言 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 第六部分 自体血清培养异体角膜缘上皮细胞后移植治疗眼烧伤后重度睑球粘连的实验研究 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 后记 |
| 致谢 |
四、新鲜人羊膜移植在重建眼表结构中的临床应用（论文参考文献）
- [1]羊膜-纤维蛋白胶泥的制备及其治疗兔重度眼表碱烧伤的实验研究[D]. 李楠钰. 昆明医科大学, 2020(02)
- [2]眼睑缺损修复中组织工程睑板替代材料的应用研究[D]. 徐佩芳. 浙江大学, 2020(01)
- [3]羊膜对角膜损伤的治疗作用及其机理研究[D]. 郭庆. 哈尔滨工业大学, 2017(01)
- [4]新鲜人羊膜移植在翼状胬肉治疗中的应用[J]. 唐国芬,董微莉,王东华,王跃丽. 中国组织工程研究与临床康复, 2010(53)
- [5]自体角膜缘干细胞与人羊膜移植治疗翼状胬肉效果比较[J]. 徐洪超,管学刚,孔庆兰. 齐鲁医学杂志, 2009(06)
- [6]三种翼状胬肉手术的临床效果比较[J]. 唐勇华,卢银波,刘生荣,秦满庆,韦丽娇. 广西中医学院学报, 2008(03)
- [7]新鲜羊膜移植治疗眼表泪液病162例临床分析[J]. 段直光,李汉钊,陶涛,许寿芬,何亚妮,李明芝. 大理学院学报, 2007(12)
- [8]深低温+100%甘油+RPMI1640合成细胞培养液保存羊膜联合角膜缘干细胞移植在眼表重建中的应用[J]. 杨丽霞,余鹰翔,陈国苍,郑祥榕. 中国组织工程研究与临床康复, 2007(46)
- [9]新鲜与保存人羊膜移植在眼表重建中的效果比较[J]. 唐国芬,阎玉梅,王跃丽,崔秀成,张媛梅,付笑笑,邓志鸿. 中国组织工程研究与临床康复, 2007(16)
- [10]体外培养角膜缘上皮细胞重建眼表的实验研究[D]. 庆惠玲. 郑州大学, 2007(06)