一、补肾活血方对拟血管性痴呆小鼠智力及其肝脏一氧化氮、超氧化物歧化酶及丙二醛的影响（论文文献综述）
高华,杨嘉君,张新华[1]（2021）在《miR-19b-3p、MnSOD、NO/ET-1与脑梗死后血管性痴呆预测效能》文中认为目的探讨微小RNA-19b-3p（miR-19b-3p）、锰超氧化物歧化酶（MnSOD）、一氧化氮与内皮素-1比值（NO/ET-1）对脑梗死后血管性痴呆（VaD）的预测效能。方法选取2017年5月至2020年6月本院收治的80例脑梗死患者,根据6个月内是否发生VaD分为VaD组（n=21）、无VaD组（n=57）。比较两组基线资料、治疗前和出院时miR-19b-3p、MnSOD、NO/ET-1、简易智力状态检查量表（MMSE）评分,采用Pearson及偏相关性分析miR-19b-3p、MnSOD、NO/ET-1与MMSE评分相关性,受试者工作特征曲线（ROC）分析miR-19b-3p、MnSOD、NO/ET-1预测VaD的价值。结果 80例脑梗死患者,随访6个月,失访2例,VaD发生率为26.92%（21/78）;VaD组吸烟史、入院时NIHSS评分、糖尿病分布情况与无VaD组比较,差异有统计学意义（P<0.05）;出院时VaD组miR-19b-3p高于无VaD组,MnSOD、NO/ET-1、MMSE评分低于无VaD组,差异有统计学意义（P<0.05）;miR-19b-3p与MMSE呈负相关,MnSOD、NO/ET-1与MMSE评分呈正相关（P<0.05）;将吸烟史、入院时NIHSS评分、糖尿病因素控制后,miR-19b-3p、MnSOD、NO/ET-1仍与MMSE评分相关（P<0.05）;miR-19b-3p+MnSOD+NO/ET-1预测VaD的AUC为0.957,大于单一指标预测（P<0.05）。结论 miR-19b-3p、MnSOD、NO/ET-1可作为临床评估脑梗死后VaD发生风险的非侵入性指标,有助于临床早期识别、干预,以改善患者预后。
任思思[2]（2021）在《益气活血法理论溯源及代表方补阳还五汤治疗脑病的meta分析》文中指出益气活血治疗法则是将补益元气与活血行血相结合而成的中医治疗法则。通过梳理益气活血法的衍化源流,其形成、发展、确立,建立在对气血理论、瘀血理论的逐渐深刻认识之上。气血为人身之本,其二者是人体重要的物质基础。气为血之帅,血为气之母,气血二者相辅相成、相得益彰,同时二者一损俱损,荣辱与共。气血认知的发展过程伴随着中华民族几千年的疾病抗争史。益气活血法萌发于秦汉时期,从认识到气血调和人体安和,气血失调遂生病证,再到瘀血病因辨证,气虚血滞的逐步出现,为益气活血法的出现奠定了基础。直到明清时期,气虚血瘀作为病因病机明确出现在医学典籍中,益气活血法随着王清任补阳还五汤的创立,逐渐得以完善、确立。气血二者,气旺促血行,气虚血生滞,益气则可以活血。若是正气虚损,气机失调,运血无力,经脉瘀阻,血行不畅无法濡养四肢百骸,则成气虚血瘀证。气为阳主煦之,血为阴主濡之,气虚致阳虚无力温养机体,且寒从中生,易为邪所侵袭;同时无力推动血液濡养周身,则脑髓清窍失养,周身经脉不利,行动障碍,麻木不仁;血液瘀阻,经脉气血更为滞涩,肢体失养,经脉拘挛,肌肤色变,不通而痛。历代医家皆认为脑血管病的发病率与人体气血失调紧密相关。脑主神明,为元神之府,脑具有主宰生命活动、精神活动、主感觉、肢体运动等功能。孙思邈有云“头者,人之元首,人神气所注,气血精明,三百六十五络,皆上归于头,头者诸阳之会也。”手足三阳经络汇于头面、行于四肢百骸,因而气血失调,脑髓失养,或外感邪气,则有瘫痪、肌肉萎缩、抽搐、震颤的症状。《黄帝内经》提出“血于气,并走于上,则为大厥”,指出气血的变化是厥病发生的基础。气虚而致清阳不升、血行不畅,气血瘀滞,脑失濡养,导致神明失用。刘完素认为“血涩而不能荣肌肉故也”,血涩难行,瘀滞不通,滋养不能,则人体肢节肌肉痿软,活动不利。“若微则但僵仆,气血流通,筋脉不挛,缓者发过如故”,说明气血流畅,肢骸贯通,则恢复如故。关于中风,张景岳认为“此证多见卒倒,卒倒多由昏愦,本皆内伤积损颓败而然,原非外感风寒所致”,王清任同样赞成中风肢体痿厥为“非风”,因此正气虚损,血液瘀滞,气虚血瘀成为脑病常见病因病机。由气血失调,气虚血瘀而致的肢体筋脉拘挛、震颤、行动不利、大脑神机不用神志障碍,可用益气活血法,“有余者泻之,不足者补之”,“补养人体气血阴阳不足”,正气充足,血行通畅,气血通和,神机得运,人体安和。现代益气活血法临床应用广泛,疗效确切,有学者对其相关方剂进行实验室研究,有证据显示,益气活血法类方能很好的修复和改善人体病理状态。在脑血管病发病初期以及恢复期,运用益气活血法代表方BYHWD进行治疗,不仅能够改善在中枢神经系统在病理上的损伤,而且在残障肢体运动功能的恢复、认知以及有效率、神经功能恢复上均优于单纯西药的治疗。因此,对益气活血法理论源头进行梳理,并对20年来益气活血法关于脑病的临床随机试验进行系统评价和meta分析,为益气活血法则在现代医药的临床应用提供中医文献理论的支撑、循证医学的证据。第一部分基于中医古籍探讨"益气活血"理论源流及运用目的全面检索古代医经典籍中有关“益气活血”法则的气血理论认识、辨证论治、处方用药等内容,通过对纳入文献进行深入的研究与分析,系统阐述古代各个时期益气活血相对应的病因病机理论分析、临床运用情况,并从整体上讨论益气活血法发展规律,探寻其历史源流,发展衍化。从整体上总结历代中医学家临症运用益气活血法的学术理论和临床经验,为现代中医药关于益气活血法则的临床应用提供理论依据。方法本研究采用中医古籍文献检索与现代文献检索技术相结合的方法,检索秦汉时期到清末的中医古籍经典中,有关益气活血相关的气血理论分析、气虚血滞、瘀血、辨证论治、用药思路等内容。梳理源流脉络时以时间顺序为经纵向体现益气活血思想发展进程,以作者、着作为纬横向展开论述,整理各个时期与研究主题相关的文字描述,提炼相关学术思想,归纳总结益气活血法的发展衍化。结果益气活血的治疗法则发展经历了萌芽、奠基、充实、发展、完善五个阶段。全文按照时间脉络梳理,分为秦汉时期、晋隋唐时期、宋时期、金元时期、明清时期。1萌芽阶段（秦汉时期）。本阶段充分阐释了气血理论,认为二者不可缺一,功能相辅成,气血为人体之本,气充成形,血畅则流行于全身,气充血足,人体安和。其中,《伤寒杂病论》首次提出血瘀的概念,并有相应活血化瘀,攻补兼施,治疗法则,见于妇科疾病的辨证论治中。2奠基阶段（晋隋唐时期）。对气血的理论认识逐渐深刻,辨证论治需察明气血,诸病寻源,明确病因病机,论证瘀血致病之时,常考虑气虚成分,多见于外科、妇产科。随着唐朝本草类专着的问世,具有益气活血功效的药物不断被总结、运用,为后世益气活血治疗法则,相应的气虚血瘀病因病机、用药思想构建起到了铺垫作用,奠定了理论基础。3充实阶段（宋时期）。丰富了气血理论,从生理病理上阐述了气血二者对人体精神状态的重要性,强调了气的重要性,并从内、外、不内外三方面探讨了血瘀症的产生,认为“虚”是血瘀产生的内在因素。益气活血法则在此阶段得到了充实,益气从补元气、益卫气具体到健脾气。4发展阶段（金元时期）。随着医家流派的出现,益气活血法在此阶段得到了长足的发展。气血二者载运相因,气虚无力,血生瘀滞,瘀血阻碍气机运行,导致气血不生,易成症瘕积聚。此时期,益气活血多用于外科、女科。益气包括益正气、卫气、脾胃之气,药物多用黄芪、人参、白术等,活血药物多用归地芎芍、干漆、桃红。5完善阶段（明清时期）。本阶段在气血之中,突出了气的作用,气虚血瘀作为益气活血法则的病因病机开始明确出现在本时期的医学着作中,相应用药则益补之活之,于活血之时增加参、芪等补中益气。直至益气活血代表方BYHWD的问世,补气益气,以大剂量黄芪为君,配以桃红四物,补气活血化瘀生新,益气活血法则正式确立下来。常见使用于临床各科。结论通过梳理益气活血法的历史衍化脉络,发现益气活血法始终伴随着历代医家对气血认识的深入程度而不断升华。形成最初,不仅认识到了气血二者生理关系,还需继续挖掘气血二者病理上的关系,益气活血法开始萌发。随着气血理论的认识逐渐深刻,开始探讨气为二者关系的主要部分,认识到气机变化确实能影响血行变化,再到在瘀血的形成过程中不离气虚,即气虚血瘀作为病因病机开始纳入研究,这为益气活血法的形成起到铺垫作用,奠定了理论基础。在益气活血不断充养、成熟的道路上,益气的内容得到极大的丰富,对益气的认识也随着医学的积累,分别有了益元气、益卫气、益脾胃中焦之气的升华,用药思路也出现了参芪、白术、补中益气,但仍为随症加减,没有形成固定的方药配伍。直到清朝王清任,集大成者,创立益气活血法代表方补阳还五汤,才将益气活血法正式确立起来。方中120g黄芪为君,以促气复血行,益气生血,归地芎芍稍加桃红,则为桃红四物,多用则破血,少用则活血,共同起到益气活血化瘀生新的功效。与此同时,益气活血法正式出现。第二部分益气活血法代表方补阳还五汤治疗脑病的meta分析目的系统评价补阳还五汤（Buyang Huanwu decocation,BYHWD）治疗脑病（中风、多发性硬化、癫痫、痴呆、头痛、头晕等）的临床疗效,为益气活血法、补阳还五汤的临床应用提供循证医学的证据。方法本研究由2名独立研究员按照PRISMA国际标准,以及纳入排除标准,检索1999.6-2020.6的中文、英文数据库,如CNKI、万方、VIP、Pubmed、Embase、Cochrane Library,收集补阳还五汤（Buyang Huanwu decocation,BYHWD）对脑病的临床随机对照试验。严格按照本研究制定的纳排除标准进行文献筛选。以Cochrane协作网偏倚风险评价工具和GRADE系统推荐级方法,进行文献质量评价。运用Review Manager5.0软件合并数据,评价指标为RR、MD。结果本研究共有21项原始文献,1946例患者纳入研究。1有效率:BYHWD+常规西药与常规西药治疗脑病的有效率为,[RR=1.19（95%CI[1.14,1.24]）,I2=21%,P<0.00001];BYHWD单用与常规西药治疗脑病的有效率为,[RR=2.38（95%CI[1.59,3.55]）,I2=0,P<0.05];表明在脑病常规治疗中加载BYHWD或者单用BYHWD的有效率优于单用西药治疗。2 NIHSS评分:BYHWD+常规西药与常规西药治疗中风的NIHSS评分,结果为[MD=-2.38（95%CI[-3.32,-1.44]）,P<0.00001,I2=81%],表明在常规西药治疗中风基础上加用BYHWD,能够明显降低神经损伤NIHSS评分,提升患者神经功能;BYHWD与常规西药治疗中风恢复期的NIHSS评分,MD=-0.35（95%CI[-2.45,-1.75]）,P>0.05,表明BYHWD单用与常规西药对比在治疗中风恢复期的NIHSS评分方面没有差异。3 ADL评分:单用BYHWD与常规西药对比治疗痴呆的日常生活能力ADL评分,[MD=6.4（95%CI[5.23,7.57]）,P<0.00001,I2=0];BYHWD+常规治疗与常规西药比较治疗中风的ADL评分,[MD=16.27（95%CI[13.73,18.80]）,I2=0,];结果表明BYHWD的加载治疗对比单用西药,能够明显提高中风患者的ADL评分。4 GRADE证据质量评级:BYHWD单用或者与常规西药的联合在中风、多发性硬化、痴呆的治疗中,其有效率、NIHSS、ADL评分方面,均优于常规西药。纳入文献GRADE证据质量评级偏于中等。结论BYHWD单用或者与常规西药联合运用在中风、多发性硬化、痴呆的治疗中,其有效率、NIHSS、ADL评分方面,均优于常规西药,对肢体活动受限以及神经功能缺损、日常生活功能的恢复,疗效均优于常规西药治疗。结语益气活血法是中医理论指导的治疗法则,临床应用广泛,尤其在脑病的防治中的疗效优越,多受重视,广为推崇。1.益气活血法萌芽于秦汉时期,气血理论、瘀血概念深入人心;奠基于晋隋唐时期,气虚血瘀的病因病机辩证逐渐清晰,并对益气活血之药进行总结;益气活血法则的气血理论充实于宋时期,对血瘀进行内因、外因、不内外因三方面的详细论述;发展于金元时期,血瘀病因病机辩证明确,用药思路渐趋成形;完善于明清时期,气虚血滞的病因病机的明确,益气活血法代表方BYHWD开始临床运用。2.益气活血法代表方BYHWD在脑病急性期与常规西药联合运用,其有效率、NIHSS、ADL评分方面,均优于常规西药单独使用;BYHWD在脑病恢复期单用,其有效率、NIHSS、ADL评分方面,均优于常规西药单独使用。BYHWD治疗脑病单用或与常规西药联合运用,对肢体活动受限以及神经功能缺损、日常生活功能的恢复,疗效均优于常规西药治疗。3.不足与展望:本研究在源流衍化汇总中,仍有不足,总结梳理的不够全面,存在相关古籍遗漏的可能;在益气活血法代表方BYHWD治疗脑病的meta分析中,缺乏高质量RCT,整体文献质量等级不高,造成研究结果存在一定偏倚;同时,本研究未系统关注益气活血法的实验室研究进展,对益气活血法提供分子生物学的理论支撑。鉴于益气活血法的使用价值,今后有必要多利用生物学、免疫学方法,进一步研究其相关有效成分和组方,对发挥作用的细胞、分子进行阐述,继续为益气活血法的临床应用提供微观的、具体的理论支撑。
千雪梅[3]（2021）在《朝医清心山药汤对血管性痴呆大鼠认知功能改善作用的实验研究》文中研究说明目的:探讨朝医清心山药汤对血管性痴呆（vascular dementia,VD）大鼠认知功能改善作用的实验研究。方法:随机将50只雄性SD大鼠分为假手术组、模型组、喜得镇组、清心山药汤低剂量组、清心山药汤高剂量组,共5组,每组10只。除假手术组之外,其余实验组均采用“两血管阻断+硝普钠降压法”建立VD大鼠模型。清心山药汤高剂量组给予1.5 g/kg的清心山药汤溶液、清心山药汤低剂量组给予0.375 g/kg的清心山药汤溶液、喜得镇组给予0.6 mg/kg、模型组与假手术组分别给予等量生理盐水。上述实验组均以灌胃给药4周,最后4天使用Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力,采用HE染色观察VD大鼠海马组织病理形态学变化,使用酶联免疫吸附法（ELISA）检测大鼠血清中乙酰胆碱酯酶（Ach E）、5-羟色胺（5-HT）含量,一氧化氮测试盒检测大鼠脑组织中一氧化氮（NO）含量,免疫组化染色观察大鼠脑源性神经营养因子（BDNF）的表达。结果:1.Morris水迷宫实验结果:模型组较假手术组上台潜伏期明显延长,其中第3和第4天差异显着（P<0.01）。清心山药汤组和喜得镇组较模型组上台潜伏期明显缩短。清心山药汤高剂量组在第3天明显缩短（P<0.05）,其中第四天潜伏期缩短差异显着（P<0.01）。2.大鼠海马区病理改变:假手术组大鼠脑海马病理切片显示神经细胞排列整齐,其细胞核完整;模型组病理切片显示大鼠脑海马区神经细胞排列紊乱且数量减少,少部分细胞固缩碎裂甚至坏死;清心山药汤高剂量组、清心山药汤低剂量组和喜得镇组相对于模型组,海马组织神经细胞数量增加,结构完整。3.ELISA检测结果:模型组较假手术组相比,大鼠血清Ach E含量显着上升（P<0.01）、5-HT含量显着下降（P<0.01）;相比模型组,清心山药汤高剂量组与喜得镇组大鼠血清中Ach E含量均显着下降（P<0.01）;与模型组相比较,清心山药汤高剂量组、低剂量组、喜得镇组5-HT含量显着升高（P<0.01）。4.一氧化氮测试盒检测结果:与假手术组比较,模型组大鼠脑组织中NO含量显着升高（P<0.01）;与模型组比较,清心山药汤低剂量组大鼠脑组织中NO含量降低（P<0.05）;与模型组比较,清心山药汤高剂量组与喜得镇组大鼠脑组织中NO含量显着降低（P<0.01）。5.免疫组化染色结果:与假手术组比较,VD模型组BDNF表达量显着减少,与VD模型组比较,治疗各组能够促进BDNF表达。结论:清心山药汤可提高VD大鼠的学习与记忆功能,可改善VD大鼠海马区神经细胞的数量和形态。清心山药汤可通过抑制VD大鼠血清Ach E活性,提高5-HT含量,降低大鼠脑组织NO含量,促进BDNF表达,进而保护VD大鼠大脑,且改善学习记忆等认知功能。
朱晓婷[4]（2021）在《解毒益智方对阿尔茨海默病双转基因小鼠行为学及大脑皮层内β-淀粉样蛋白沉积及BACE1表达影响的研究》文中研究说明选题依据:阿尔茨海默病（AD）致残、致死率高,发病机制复杂,大脑内Aβ异常沉积是AD发生发展的重要病理变化及核心环节,前期研究已证实了解毒益智方具有抑制AD线虫头部Aβ斑块沉积及相关基因表达的作用,随之开展的随机对照临床研究证实解毒益智方应用6个月后MMSE、MoCA、ADL评分变化明显优于口服尼莫地平片的对照组。黄连为解毒益智方中的君药,为该方的主要成分,在本方中发挥“解毒”的重要功效。经查阅国内外文献发现黄连中发挥“解毒”作用的主要物质为黄连多糖（CCP）,因此设计体外细胞实验探究解毒益智方中的君药黄连的主要有效成分CCP对Aβ25-35损伤PC12的保护作用,为“毒损”的病机及“解毒”的治法提供理论依据,为后续研究提供研究基础。因前期开展的研究均是以单基因单细胞的生物为研究对象,不能很好地模拟AD的疾病特点,因此选用APP/PS1双转基因小鼠作为研究对象,该小鼠很好的模拟了中枢神经系统Aβ异常沉积的状态,通过对小鼠的行为学研究及分子生物学研究,进一步评价解毒益智方的治疗作用。目的:通过体外细胞实验探讨基于“补肾益髓、活血化痰解毒”法形成的解毒益智方其中君药的有效成分CCP对Aβ25-35损伤PC12的保护作用。通过行为学、分子生物学等研究手段,对APP/PS1小鼠的认知功能、Aβ沉积、BACE1表达的相关蛋白、基因等方面进行检测和分析,探讨解毒益智方对APP/PS1小鼠的作用机制,为中药治疗AD的推广应用提供可靠的研究证据。方法:1.本研究分别从体外实验、动物实验探究解毒益智方的作用机制。体外实验部分采用MTT还原法、Hoechst33258荧光染色等方法对Aβ25-35诱导的PC12细胞损伤模型进行线粒体活性、细胞活力、细胞凋亡的测定,探究CCP对PC12细胞的保护作用。动物实验部分选用APP/PS1双转基因小鼠为研究对象,随机分为5组,分别是模型组（APP/PS1组）、盐酸多奈哌齐组（Donepezil组）、解毒益智方低剂量组（JDYZFL组）、解毒益智方中剂量组（JDYZFM组）、解毒益智方高剂量组（JDYZFH组）,每组16只小鼠,另选用16只C57小鼠作为正常对照组（Control组）,于每日早晨8:30进行灌胃治疗,各组每日灌胃药物及剂量分别是,正常组和模型组0.5%CMC溶液0.20g·kg-1·d-1;阳性对照组:盐酸多奈哌齐溶液0.30g·kg-1·d-1;解毒益智方高、中、低剂量组药物浓度依次为0.60g·kg-1·d-1,0.3g·kg-1·d-1,0.15g·kg-1·d-1。持续6个月治疗结束。2.以Aβ25-35损伤的PC12细胞为研究对象,通过测定细胞活力、LDH释放率、细胞凋亡率、和线粒体膜电位的水平等评价CCP的神经保护作用。3.通过水迷宫实验,记录解毒益智方对APP/PS1小鼠学习记忆能力的影响。4.通过ELISE及免疫荧光法检测APP/PS1小鼠脑内Aβ水平的变化,观察解毒益智方对APP/PS1小鼠脑内Aβ沉积的影响。5.采用PCR方法检测脑组织SIRT1、NF-κB、BACE1基因量变化,并进一步采用Western blot方法检测大脑皮层内SIRT1、BACE1、NF-κB蛋白的变化,观察解毒益智方对APP/PS1小鼠脑内AMPK/SIRT1-PPARγ-PGC1α-BACE1转运蛋白通路SIRT1、BACE1、NF-κB的影响。结果:1.通过体外研究观察CCP对Aβ25-35诱导的PC12细胞损伤的影响PC12细胞活力测定结果显示:PC12细胞经过浓度为5-50μM的Aβ25–35处理24h后,细胞活力随着Aβ25–35浓度的增加从24%下降至61%。当Aβ25–35在浓度范围为5至50μM时引起PC12细胞中LDH释放增加至对照组的约130-160%。在用不同浓度的CCP（5至200μg/ml）处理PC12细胞24h后,未观察到显着的细胞损失。通过Hoechst33258染色及FCM测定细胞凋亡结果显示:细胞核在荧光显微镜下具有显着的浓缩核和凋亡的细胞形成。与在未处理的PC12细胞中观察到的完整,圆形和相对大的细胞核相比,暴露于50μMAβ25–35 24h的细胞显示出典型的细胞凋亡特征,包括染色质浓缩,核碎裂和凋亡小体的出现。用CCP不同浓度（5,25,50,100,200μg/ml）处理后可有效逆转细胞凋亡,其中100μg/ml效果最明显,FCM分析显示单独暴露于50μMAβ25–35 24h导致58.88±6.12%的凋亡率,这与正常对照组中的7.21±0.82%的值显着不同（P<0.01）。加入100μg/ml的CCP后,细胞凋亡下降至12.51±1.32%。通过JC-1红色荧光与JC-1绿色荧光的比率的变化来检测Aβ诱导的线粒体功能障碍结果显示:当PC12细胞暴露于50μM的Aβ25–35中24h后,与正常对照组相比,显着减弱了JC-1的红色荧光比例,提高了JC-1绿色荧光比例（P<0.01）。用CCP（100μg/ml）预处理Aβ25–35处理的PC12细胞显着抵消了Aβ25–35损伤引起的膜电位损失,JC-1从Aβ25–35处理的PC12细胞中的22.1%变为绿色荧光至84.3%,与正常对照组相近（P>0.05）。通过蛋白质印迹法检测细胞色素C结果显示:经50μMAβ25–35处理PC12细胞24h后细胞色素C在细胞质中的蛋白质表达增加,而预先用CCP（100μg/ml）处理的PC12细胞显着减弱线粒体释放的胞质细胞色素C。2.观察JDYZF对APP/PS1双转基因小鼠学习记忆能力的影响。水迷宫实验结果显示:随着实验天数的后移,各组小鼠潜伏期、路径长度、游泳距离均有所缩短,表明随着训练次数的增加各组小鼠对象限平台的定位记忆能力随之有所提升。与Control组相比,APP/PS1组逃避潜伏期、路径长度、游泳距离均明显延长,差异显着（P<0.01）。首次到达平台的时间明显延长,目标停留次数明显减少,差异显着（P<0.01）。与APP/PS1组相比,Donepezil组、JDYZFL组、JDYZFM组逃避潜伏期、路径长度、游泳距离有所缩短,差异有统计学意义（P<0.05,P<0.01）。首次到达平台的时间缩短,目标停留次数增多,差异有统计学意义（P<0.05,P<0.01）。与Donepezil组相比,JDYZFL组作用与其相当,JDYZFM组略优于Donepezil组,差异有统计学意义（P<0.05）。干预治疗6个月的12月龄小鼠的定位航行实验及空间搜索实验结果优于干预治疗3个月的9月龄小鼠,差异有统计学意义（P<0.05）。3.观察JDYZF对APP/PS1双转基因小鼠脑内Aβ沉积的影响。各组小鼠结果如下:与Control组比较,APP/PS1组大脑皮层内可溶性及不可溶性Aβ1-40、Aβ1-42沉积极数量明显增多,具有极显着统计学意义（P<0.01）。与APP/PS1组相比,JDYZFL组、JDYZFM组及Donepezil组大脑皮层内可溶性及不可溶性Aβ1-40、Aβ1-42沉积数量不同程度降低,具有统计学意义（P<0.05,P<0.01）。与Donepezil组比较,JDYZFM组大脑皮层内可溶性及不可溶性Aβ1-40、Aβ1-42沉积数量有所降低,差异具有统计学意义（P<0.05）。通过免疫荧光法测得小鼠大脑皮层内Aβ表达发现,Control组只产生微量Aβ,而APP/PS1组Aβ表达量明显增高,经过用药干预后,12月龄干预组小鼠可溶性及不可溶性Aβ1-40、Aβ1-42沉积数量较9月龄小鼠明显减少,免疫荧光标记从宏观上可以发现干预组Aβ沉积明显减少,APP/PS1组Aβ沉积明显增多。4.调控BACE1表达的相关因子结果（1）PCR检测结果各组小鼠进行的PCR检测结果显示:与Control组相比,APP/PS1组小鼠大脑皮层内BACE1/GAPDH、NF-κB/GAPDH表达含量明显增高,SIRT1/GAPDH明显降低,差异有显着统计学意义(（P<0.01）。与APP/PS1组相比,Donepezil组、JDYZFL组及JDYZFM组小鼠海马体内BACE1/GAPDH、NF-κB/GAPDH表达含量不同程度降低,SIRT1/GAPDH表达含量不同程度增高,差异具有统计学意义（P<0.05,P<0.01）。JDYZFH组在NF-κB/GAPDH表达上无统计学差异。与Donepezil组相比,JDYZFL组及JDYZFM组BACE1/GAPDH、NF-κB/GAPDH表达含量不同程度降低,差异具有统计学意义（P<0.05）。PCR结果证实药物干预组可通过提高SIRT1mRNA的含量降低NF-κBmRNA、BACE1mRNA的表达,从而抑制Aβ的产生而起到神经保护的作用。各治疗组大脑皮层Aβ的表达均有所降低。连续灌胃6个月的各组小鼠与连续灌胃3个月的小鼠相比,除APP/PS1组及Control组,其他各组SIRT1mRNA的表达均有所提高,NF-κBmRNA、BACE1mRNA的表达均有所降低,差异具有统计学意义（P<0.05）。（2）Westorn blot检测结果各组小鼠的Western blot检测结果显示:与Control组相比,APP/PS1组小鼠大脑皮层SIRT1的蛋白表达明显降低,NF-κB、BACE1蛋白表达显着升高（P<0.01）。与APP/PS1相比,Donepezil组、JDYZFL组、JDYZFM组BACE1、NF-κB表达降低,SIRT1蛋白表达增高差异有统计学意义（P<0.05）。与Donepezil比较,JDYZFL组、JDYZFM组NF-κB蛋白表达有所降低,差异有统计学意义（P<0.05）。JDYZFL组SIRT1、BACE1蛋白表达无显着差异,JDYZFM组SIRT1表达有所提高,BACE1蛋白表达量略有降低,差异有统计学意义（P<0.05）。经过为期3个月及6个月的干预后,各治疗组大脑皮层Aβ的表达均有所降低。连续灌胃6个月的各组小鼠与连续灌胃3个月的小鼠相比,除APP/PS1组及Control组,其他各组SIRT1的蛋白表达均有所提高,NF-κB、BACE1蛋白的表达均有所降低,差异具有统计学意义（P<0.05）。结论:1 CCP能够保护Aβ25-35损伤的PC12细胞,其机制可能与提高细胞活力、抑制细胞凋亡、减少LDH释放、阻断膜电位的丧失,并阻止线粒体细胞色素C释放,修复线粒体功能障碍有关。2 JDYZF各剂量组可不同程度提高APP/PS1双转基因小鼠定位航行实验及空间搜索实验的成绩,说明JDYZF可改善小鼠空间学习及记忆能力。3 JDYZF可不同程度降低APP/PS1双转基因小鼠大脑皮层内Aβ的异常沉积。4 JDYZF抑制BACE1的异常表达,其作用机制可能是通过调控大脑内AMPK/SIRT1-PPARγ-PGC1α-BACE1信号通路的相关因子表达实现的。
王俊兰[5]（2021）在《眼区电针治疗血管性痴呆的临床研究》文中认为目的:观察眼区电针疗法治疗血管性痴呆的临床疗效,为血管性痴呆患者的治疗提供一种新的思路和方法。方法:采用随机数字表把纳入的90例血管性痴呆患者分成两组,分别为眼区电针组和常规针刺组,每组各45例。两组患者都需要予以内科标准治疗和头针治疗。眼区电针组的治疗方法是针刺双侧眼区的肾区、心区后再接电针,常规针刺组的治疗方法是针刺印堂、太溪（双侧）、悬钟（双侧）、足三里（双侧）、三阴交（双侧）,得气后,足三里接电针仪正极,三阴交接电针仪负极。电针使用疏波,频率为20Hz,强度以患者能耐受为度,留针30min,每日一次,一周6次,一疗程三周。测定并统计分析血管性痴呆患者治疗前后的ADAS-cog量表、MMSE量表、ADL量表和SDSVD量表评分,并评价患者的临床疗效。结果:（1）两组患者临床疗效分析:眼区电针组总有效率为75.56%,常规针刺组总有效率为57.78%,眼区电针组优于常规针刺组,差异显着,有统计学意义（P<0.05）;（2）治疗前后,两组患者的ADAS-cog、MMSE、ADL和SDSVD量表评分进行组内对比,P<0.05,差异显着,具有统计学意义。（3）治疗后,两组患者的ADAS-cog、MMSE、ADL和SDSVD量表评分组间比较,P<0.05,差异显着,具有统计学意义,说明眼区电针组对血管性痴呆的疗效优于常规针刺组。结论:1.眼区电针疗法能够提高血管性痴呆患者的认知能力水平,提升其日常生活能力,改善其精神状态,改良其中医证候;2.眼区电针治疗血管性痴呆取穴少,见效快,疗效显着,安全可靠,可以进一步发展和完善。
王添全[6]（2021）在《戟天健脑方调节低糖低氧下大鼠海马神经细胞突触可塑性的机制研究》文中研究表明背景:血管性痴呆（Vasculardementia,VD）是指因脑血管病和缺血性或出血性脑损伤而产生认知障碍的一类疾病。患者在脑血管疾病影响下,脑内缺血缺氧时神经元突触可塑性发生改变甚至死亡。VD发病机制较为复杂,目前的研究表明,VD的相关发病机制包括胆碱能传导通路受损、突触可塑性的改变、氧化应激和炎性反应、遗传机制等。VD的临床症状主要是脑内血氧不足引起的神经元细胞损伤导致的。对于血管性痴呆的防治目前仍缺乏根本性的方法,除了针对血管性痴呆危险因素的有效控制外,主要以改善患者脑血管代谢如使用尼莫地平片或者改善患者认知功能如使用胆碱酯酶抑制剂为主要治疗手段,临床观察显示出一定疗效,但仍需大规模临床验证。中医学对VD的治疗着重于整体调节、辨证论治的理念,取得了一定的效果。VD属于中医“痴呆”、“呆病”等范畴,其主要发病机制是肾精亏虚、脑脉不充。中医治疗VD治则治法主要以“补”为主,脑为元神之府、髓之海,脑神失养而致痴呆,故治痴呆应补先天之精、养后天之气。戟天健脑方补肾祛湿,安神定智,治疗轻度VD疗效确切,能显着改善患者的认知能力和日常生活活动能力。新近发现微小RNA-132（miR-132）可以作为调控突触可塑性的重要因子,能与多种靶基因及相关蛋白相互作用,形成信号网络,调节突触形态变化和可塑性过程。本研究旨在应用低糖低氧条件诱导大鼠海马神经元细胞模拟VD患者脑部神经元的损伤,观察戟天健脑方及miR-132对大鼠海马神经元细胞损伤模型的保护作用及机制。目的:分析戟天健脑方与miR-132介导的信号网络对低糖低氧诱导大鼠海马神经元突触可塑性调节中的干预作用及其靶点机制。方法:SD大鼠分为五组给予戟天健脑方水煎剂高、中、低剂量,尼莫地平溶液及生理盐水,灌胃7天后制备含药血清。离体原代培养乳鼠海马神经元细胞,收集神经细胞以每孔4×105个接种于24孔板中,完全培养基（高糖）培养。实验分为10组:空白组,模型组,阳性组,戟天健脑方高、中、低剂量组,miR-132 增强组,miR-132 抑制组,miR-132 阳性对照组,miR-132 阴性对照组,转染组使用脂质体转染相应RNA片段。待细胞在培养至70%-80%时利用微管相关蛋白（Microtubule-associatedprotein2,MAP-2）进行细胞鉴定。鉴定完成后开始造模,空白组使用空白含药培养基（高糖）培养,阳性组,戟天健脑方高、中、低剂量组使用各自含药培养基（低糖）,剩余模型组,miR-132转染组使用空白含药培养基（低糖）。低氧条件下培养6小时后取出,正常氧条件下恢复20小时。免疫组化法检测突触后膜致密物质95（PSD-95）、甲基CpG结合蛋白2（MecP2）、三磷酸鸟苷酶活化蛋白（p250GAP）的表达,免疫荧光法观察突触特异性指标突触生长相关蛋白43（GAP-43）、突触素（Syn）蛋白表达位点,酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测细胞中环磷酸腺苷应答元件结合蛋白（CREB）、脑源性神经营养因子（BDNF）的含量。结果:与空白组相比,模型组中海马神经元细胞PSD-95、MecP2、GAP-43、Syn表达明显减少,p250GAP表达明显增加,CREB、BDNF含量明显减少（P<0.05或P<0.01）;与模型组相比,阳性组及戟天健脑方高、中、低剂量组中PSD-95、MecP2、GAP-43、Syn 表达明显增加,p250GAP 表达明显减少,CREB、BDNF含量明显增加（P<0.05或P<0.01）。与模型组相比,miR-132阳性对照组中GAP-43、Syn表达明显增加,CREB含量明显增加（P<0.05或P<0.01）,miR-132增强组中GAP-43、Syn表达明显增加（P<0.05或P<0.01）,-miR-132抑制组中GAP-43表达明显减少（P<0.05）。结论:戟天健脑方可能通过调节MecP2、p250GAP等蛋白介导miR-132信号网络表达,增加CREB、BDNF含量,从而增强PSD-95、GAP-43、Syn表达,促进突触重塑,保护大鼠海马神经元细胞。
程越[7]（2021）在《补脾醒神益智法对脾虚认知功能障碍大鼠TREM2/NF-κb信号通路作用机制的研究》文中研究表明目的:以“脾脑相关”理论为指导,系统论述认知功能障碍与脾脏的相关性,并采取病证结合方式,建立脾虚认知功能障碍大鼠模型,探究补脾醒神益智方对脾虚认知功能障碍的疗效及作用机制,为临床防治认知功能障碍提供理论及实验依据。材料与方法:第一部分:理论研究通过对古籍文献的整理以及相关理论的分析,梳理认知功能障碍的病名及病因病机,从脾与脑、脾与认知功能、脾与衰老等多方面论述脾与认知功能障碍的密切关系,探究补脾醒神益智法作为防治认知功能障碍治法的优势及补脾醒神益智方广阔的应用前景。第二部分:实验研究将60只SPF级SD大鼠,雌雄各半,随机分为正常组、认知功能障碍组、脾虚认知功能障碍组、安理申组、补脾醒神益智方组,共5组,每组12只,适应性喂养1周。采用复合因素、病证结合以及海马注射Aβ1-42的方法建立脾虚认知功能障碍模型,即第2、3周进行脾虚模型的建立,第4周进行海马CA1区Aβ1-42注射后进入灌胃治疗阶段,正常组、认知功能障碍组及脾虚认知功能障碍组治疗期间予0.9%生理盐水灌胃,剩余两组予对应药物灌胃,治疗周期为4周。于灌胃第四周依序开始进行水迷宫适应性训练、定位航行以及空间探索实验,评价不同组别之间大鼠的学习记忆能力。最后一次灌胃结束后,禁食24h后麻醉取材,采用HE染色法观察和分析各组大鼠脑组织神经元形态的变化,ELISA法检测各组别大鼠血清TNF-α、IL-1β、IL-6的表达,运用RT-PCR及Western blot法检测脑组织中Aβ、NF-κB、TREM2、DAP12、IκB、ERK1/2的mRNA及蛋白的表达情况,从炎症反应的角度观察和探讨补脾醒神益智方改善脾虚认知功能障碍大鼠学习记忆障碍的可能机制。结果:第一部分:理论研究1 通过对古籍中认知功能障碍相关内容的梳理,其相关病名的描述多以“忘”及“呆”为主,并呈现出一定病情严重程度上的递进关系。2 脾虚是老年人群也是认知功能障碍患者的常见证候,脾脏与脑经络相连,气血相通,脾虚则脑髓失养,脾失健运则痰浊内生,因虚致瘀,痰瘀阻窍,从而导致认知功能障碍的发生,故认知功能障碍的防治可从“脾脑相关”理论立论。3 补脾醒神益智法可通过补脾而益气生血,从根本上阻断痰瘀内生,达到益智醒神开窍的作用,是防治认知功能障碍的有效治法。第二部分:实验研究1 大鼠的一般状态结果:在治疗阶段结束后,与正常组相比,认知功能障碍组以及脾虚认知功能障碍组呈现不同程度精神萎靡,毛发粗糙,缺乏光泽,大便溏稀,并伴随出现眯眼及嗜睡等症状,与两模型组相比,各治疗组一般状态均有所好转,补脾醒神益智方组大鼠好转程度优于安理申组。2 行为学实验结果2.1 定位航行实验:与正常组相比,认知功能障碍组及脾虚认知功能障碍组的逃避潜伏期明显增加（P<0.01）,与两模型组相比,各治疗组逃避潜伏期均明显改善（P<0.01）,两治疗组逃避潜伏期比较无明显差异（P>0.05）。2.2 空间探索实验:与正常组相比,认知功能障碍组及脾虚认知功能障碍组首次穿越目标区域所需时间明显延长,穿越该区域的次数明显减少,目标象限停留时间缩短（P<0.01）,脾虚认知功能障碍组首次穿越目标区域所需时间较认知功能障碍组延长（P<0.05）。中药组及西药组均可以在一定程度上改善痴呆大鼠的记忆能力,与模型组相比,各治疗组首次穿越目标区域所需时间,穿越次数及目标象限的停留时间均优于模型组。在空间探索实验中,正常组行进轨迹较为简单,并存在多次反复折返探索的行为,痴呆组及脾虚痴呆组整体行进轨迹较杂乱无章,在各象限停留时间较为均衡。3形态学结果:与正常组比较,认知功能障碍组及脾虚认知功能障碍组,海马区及海马区周围皮质神经元数目明显减少,排列稀疏,细胞体积增大,核仁固缩,细胞核染色加深,锥体细胞数目减少,排列紊乱,出现空泡样变性。安理申组及补脾醒神益智方组海马区及海马周围皮质神经元数目与模型组相比明显增多,但仍低于正常组,细胞形态较为规则,锥体细胞的树突数量与各模型组相比明显上升,空泡变性及细胞的固缩坏死数量减少。4 ELISA结果:与正常组比较,认知功能障碍组及脾虚认知功能障碍组IL-1β、IL-6以及TNF-α表达含量明显上升（P<0.01）,且脾虚认知功能障碍组的增高幅度明显高于认知功能障碍组,具有统计学意义,与两模型组相比,安理申组及补脾醒神益智方组与模型组相比IL-1β、IL-6以及TNF-α表达明显下降（P<0-01）,且补脾醒神益智方组对其下调作用更显着。5 RT-PCR结果:与正常组比较,认知功能障碍组及脾虚认知功能障碍组NF-κBmRNA的相对表达量明显上调（P<0.01）,IκBmRNA的相对表达量明显下调（P<0.01）,与认知功能障碍组比较,安理申组及补脾醒神益智方组NF-κBmRNA相对表达量明显下调,IκBmRNA的相对表达量上调,组间相对表达量无明显差异。与正常组比较,认知功能障碍组及脾虚认知功能障碍组TREM2mRNA、DAP12mRNA的相对表达量明显下调（P<0.01）,与两模型组比较,安理申组及补脾醒神益智方组均可上调TREM2mRNA的相对表达量（P<0.01）,且补脾醒神益智方对二者的上调作用优于安理申组。与正常组比较,认知功能障碍组及脾虚认知功能障碍组ERK1、ERK2mRNA的相对表达量明显上调（P<0.01）,与模型组比较,两治疗组ERK1、ERK2mRNA的相对表达量明显下调,但两治疗组组间比较无统计学意义。6 Western Blot结果:与正常组相比较,认知功能障碍组及脾虚认知功能障碍组海马组织中Aβ、NF-κB、ERK1/2的蛋白表达量明显上升（P<0.01）,IκB、TREM2以及DAP12的蛋白表达含量明显下降（P<0.01）,两治疗组与脾虚认知功能障碍组相比,Aβ、NF-κB、ERK1/2的蛋白表达明显下降（P<0.01）,IκB、TREM2以及DAP12的mRNA表达含量明显上升（P<0.01）。且补脾醒神益智方组对TREM2的上调以及Aβ的下调幅度高于安理申组,两者具有统计学意义（P<0.05）。结论:1 脾虚是认知功能障碍发病的关键病机,且与认知功能障碍的主要病理产物痰浊、血瘀关系密切。补脾醒神益智法及其方药从“脾脑相关”理论出发,通过补脾益气,促进气血运行,进而充养脑髓,气血调和,醒神开窍,对于认知功能障碍的防治具有充分的理论依据及广泛应用前景。2 脾虚复合因素造模方法结合Aβ1-42海马注射可成功构建脾虚认知功能障碍模型,出现学习记忆能力减退以及炎症损伤,较为贴切复制了临床中认知功能障碍患者的症状特点。3 补脾醒神益智方可明显改善脾虚认知功能障碍大鼠的便溏、毛发粗糙、精神萎靡等脾虚证候表现,同时提高模型大鼠定位巡航以及空间探索能力,恢复其学习记忆能力。4 补脾醒神益智方可改善认知功能的作用机制与TREM2/NF-κB信号通路有关,通过上调TREM2及其配体DAP12的mRNA及蛋白的表达,同时抑制NF-κB炎性通路的激活,降低脑组织中Aβ及炎性因子的含量,从而发挥对认知功能障碍的防治作用。
孙成成[8]（2021）在《基于线粒体相关蛋白通路探讨参麻益智方对血管性认知障碍大鼠的作用机制》文中研究指明血管性认知障碍（Vascular cognitive impairment,VCI）是包括一系列因血管因素引起或导致的认知能力下降的综合征,涵盖了与血管疾病相关的所有类型的认知障碍,范围从轻度认知障碍到血管性痴呆（Vascular dementia,VaD）。目前,由于临床表现的异质性和当前诊断标准的局限性,VCI的流行病学较难开展,随着我国人口老龄化加剧及脑血管疾病的发病率上升,VCI的发病率和患病率也不断上升。VCI病因及病理机制复杂,与机体炎症反应、自由基损伤、胆碱能受损、细胞凋亡及遗传等因素密切相关,但VCI仍被认为是可以防治的。目前,VCI的主要治疗方法是通过治疗脑血管疾病和其他VCI危险因素（例如高血压和糖尿病）来预防,目前尚无可改善疾病的有效药物治疗方法。本课题组拟定了防治VCI的中药复方—参麻益智方,已批准为医疗机构应用传统工艺配制中药制剂备案（备案号:Z20200005000）。该方由人参、天麻、鬼箭羽、川芎组成,具有益气增智、活血化瘀的功效。前期动物实验和临床研究表明参麻益智方可以改善VCI大鼠及患者认知和神经功能。由此,本研究以参麻益智方作为干预药物,观察其对VCI模型大鼠的学习记忆和认知能力的影响及其对脑组织线粒体的超微结构和AMPK/PPARα/PGC-1α/UCP2信号通路的影响,探讨其对脑组织能量代谢的作用机制,为其防治VCI提供科学依据。目的确定参麻益智方的提取工艺及主要有效成分;观察参麻益智方对双侧颈总动脉结扎造成慢性脑缺血致血管性认知障碍模型大鼠的学习记忆能力和炎症因子及氧化应激相关指标的影响;探讨慢性脑低灌注大鼠脑能量代谢和线粒体障碍相关蛋白AMPK、PPARα、PGC-1α、UCP2的病理机制及参麻益智方的干预效应机制及可能的作用靶点。方法采用液相色谱-质谱联用仪系统（liquid chromatography-mass spectrometry,LC-MS）分析参麻益智方的主要化学成分。SPF级SD大鼠70只,雌雄各半,采用双侧颈总动脉结扎法制备慢性脑缺血模型,手术成功后筛选认知障碍的大鼠按随机数字表分成4组:模型对照组（Model）、盐酸多奈哌齐组（Donepezil）（0.45 mg/kg体质量）、参麻益智方高剂量组（SMYZ-H）（11.88 g生药/kg体质量）和参麻益智方低剂量组（SMYZ-L）（2.97g生药/kg体质量）。另设假手术组（Sham）,每组各10只大鼠。灌胃给药,模型对照组和假手术组给予等体积纯净水灌胃,连续灌胃8周后进行相关指标检测。Morris水迷宫（Morris water maze,MWM）检测大鼠学习记忆能力;HE染色法观察大鼠海马CA1区病理形态学改变;比色法检测血清中乙酰胆碱（acetylcholine,Ach）、乙酰胆碱酯酶（acetylcholinesterase,AchE）含量;酶联免疫法测定大鼠血清炎症因子白细胞介素-1β（Interleukin-1β,IL-1β）和肿瘤坏死因子-α（tumornecrosisfactor-α,TNF-α）含量;比色法检测谷胱甘肽（glutathione,GSH）、丙二醛（malondialdehyde,MDA）、超氧化物歧化酶（superoxidedismutase,SOD）含量;非酶促免疫法检测谷胱甘肽过氧化物还原酶（glutathioneperoxidase,GSH-PX）含量。透射电子显微镜观察线粒体的超微结构和形态改变;脑组织中提取线粒体进行逆转录-聚合酶链反应（Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,RT-PCR）检测AMPK、PPARα、PGC-1α、UCP2、ATP5AmRNA表达的水平;蛋白质免疫印迹法（Western Blot,WB）检测 AMPK、pAMPK、PPARα、PGC-1α、UCP2、ATP5A 蛋白的表达。结果1参麻益智方成分稳定明确课题组采用液相色谱-质谱联用仪系统分析了参麻益智方的主要化学成分,并结合文献报道,确定了参麻益智方中人参皂苷、天麻素、阿魏酸、原儿茶酸、β-谷甾醇等多种主要化学成分。2参麻益智方对VCI大鼠学习记忆能力的影响2.1参麻益智方对VCI大鼠空间学习记忆能力的影响定位航行实验:与第1天相比,所有大鼠在训练第2天的逃避潜伏期（escape latency,EL）均明显缩短（P<0.05,P<0.01）,提示所有大鼠均表现出一定的学习记忆能力。经重复测量方差分析,与对照组比较,模型组大鼠第三天开始EL明显延长,差异有统计学意义（P<0.05,P<0.01）,提示模型组大鼠的空间学习能力明显下降;与模型组比较,参麻益智方高剂量组和盐酸多奈哌齐组EL均明显缩短,差异有统计学意义（P<0.05,P<0.01）,提示参麻益智方和盐酸多奈哌齐均可提高VCI大鼠的空间学习能力。空间探索实验:与假手术组比较,模型组穿越原平台次数、目标象限停留时间、目标象限活动路程均显着减少,统计学比较有显着差异（P<0.05,P<0.01）;与模型组比较,盐酸多奈哌齐组和参麻益智方高剂量组穿越原平台次数均显着增加,参麻益智方高剂量组目标象限停留时间、目标象限活动路程均显着增加,统计学比较有显着差异（P<0.05,P<0.01）。2.2参麻益智方对VCI大鼠海马CA1区病理形态的影响光学显微镜下海马组织显示,假手术组大鼠海马CA1区神经元排列整齐,连接紧密,胞内结构完整,胞膜清晰,胞质丰富,核膜、核仁较明显,未见神经元变性或坏死。模型组大鼠的海马CA1区神经元排列散乱、稀疏,细胞数量明显减少,层次减少,部分出现核固缩现象,可见细胞空泡变性,甚至坏死现象。盐酸多奈哌齐组、参麻益智方低、高剂量组海马CA1区神经元排列较模型组有一定的改善,细胞数量较模型组有明显增加,细胞结构较完整,细胞膜较为清晰,偶见细胞空泡变性,少有细胞坏死现象。2.3参麻益智方对VCI大鼠血清Ach、AchE含量的影响与假手术组比较,模型组Ach含量显着减少,AchE含量显着增多,统计学比较有显着差异（P<0.01）;与模型组比较,盐酸多奈哌齐组和参麻益智方高剂量组Ach含量均显着增加,统计学比较有显着差异（P<0.05,P<0.01）;盐酸多奈哌齐组和参麻益智方高剂量组AchE含量显着减少,统计学比较有显着差异（P<0.05,P<0.01）。各给药组之间比较无显着差异（P>0.05）。2.4参麻益智方对VCI大鼠血清炎症因子IL-1β、TNF-α含量的影响与假手术组比较,模型组IL-1β、TNF-α含量均显着增加,统计学比较有显着差异（P<0.01）;与模型组比较,盐酸多奈哌齐组和参麻益智方低、高剂量组IL-1β含量均显着减少,统计学比较有显着差异（P<0.01）;盐酸多奈哌齐组和参麻益智方低、高剂量组TNF-α含量均显着减少,统计学比较有显着差异（P<0.05,P<0.01）。2.5参麻益智方对VCI大鼠血清GSH、MDA、SOD、GSH-PX含量的影响与假手术组比较,模型组GSH、GSH-PX含量均显着减少,MDA含量均显着增加,统计学比较有显着差异（P<0.05,P<0.01）;与模型组比较,盐酸多奈哌齐组和参麻益智方高剂量组GSH、GSH-PX含量均显着增加,MDA含量均显着减少,统计学比较有显着差异（P<0.05,P<0.01）;参麻益智方高剂量组SOD含量均显着增加,统计学比较有显着差异（P<0.05,P<0.01）。各给药组之间比较无显着差异（P>0.05）。3参麻益智方对VCI大鼠脑组织线粒体的影响3.1参麻益智方对VCI大鼠脑组织线粒体数量的影响参麻益智方干预后荧光显示线粒体数量有一定程度的增加,说明参麻益智方能增加双侧颈总动脉结扎所致的VCI大鼠的线粒体数量。3.2参麻益智方对VCI大鼠脑组织线粒体超微结构的影响假手术组大鼠脑组织线粒体结构基本正常,排列整齐,膜形态基本完整,线粒体嵴致密,无明显肿胀和空泡形成。模型组大鼠脑组织线粒体结构明显改变,线粒体膜模糊,部分膜出现破裂,线粒体嵴断裂,疏松溶解,并伴有基质颗粒减少或消失。盐酸多奈哌齐组和参麻益智方高剂量、低剂量组线粒体结构明显改善,线粒体膜总体清晰,线粒体嵴基本完整,说明参麻益智方可以改善VCI大鼠脑组织线粒体结构。3.3参麻益智方对VCI大鼠脑组织线粒体关键蛋白AMPK、PPARα、PGC-1α、UCP2、ATP5A mRNA表达水平的影响与假手术组比较,模型组AMPK、PPARα、PGC-1α和ATP5A mRNA表达水平明显低于对照组（P<0.05,P<0.01）。参麻益智方干预后,AMPK、PPARα、PGC-1α和ATP5A mRNA的表达均较模型组显着升高（P<0.05,P<0.01）。模型组UCP2mRNA表达高于假手术组,差异有统计学意义（P<0.01）。与模型组比较,盐酸多奈哌齐组、参麻益智方高剂量组（SMYZ-H）和参麻益智方低剂量组（SMYZ-L）UCP2mRNA表达均降低,差异有统计学意义（P<0.05,P<0.01）。3.4参麻益智方对VCI大鼠脑组织线粒体关键蛋白AMPK、pAMPK、PPARα、PGC-1α、UCP2、ATP5A蛋白表达的影响与假手术比较,模型组pAMPK、PPARα、PGC-1α、UCP2、ATP5A蛋白表达水平降低,差异有统计学意义（P<0.05,P<0.01）。与模型组比较,参麻益智方高剂量组（SMYZ-H）pAMPK、PPARα、PGC-1α、UCP2、ATP5A蛋白表达水平均显着升高,差异有统计学意义（P<0.05,P<0.01）。而AMPK蛋白表达水平无明显差异,提示AMPK可能通过磷酸化参与此途径。结论1确定了参麻益智方的最佳提取工艺及主要化学成分,为探讨其防治VCI的药理作用和机制研究提供了化学物质基础。2脑组织线粒体结构改变和能量代谢障碍可能是VCI的重要病理基础。3参麻益智方具有提高慢性脑低灌注致VCI大鼠学习记忆能力的作用,并改善海马组织的病理形态,保护神经元,增强胆碱能系统功能,抑制炎症反应,提高机体抗氧化能力。其作用机制和提高线粒体关键蛋白AMPK、PPARα、PGC-1α、UCP2的表达,改善脑组织能量代谢相关。
姜海伟[9]（2021）在《基于“毒损脑络”理论黄连解毒汤早期干预卒中后认知障碍的临床及实验研究》文中进行了进一步梳理目的1.通过对缺血性卒中后认知障碍（PSCI）相关“毒邪”进行具体分类,了解各类毒邪的临床分布特征及总体特性,初步分析黄连解毒汤用于PSCI治疗的可行性。2.基于“毒损脑络”理论,通过黄连解毒汤早期干预PSCIND患者,分析其对认知功能、日常生活能力、实验室指标、中医证候评分的疗效作用,并了解PSCI毒邪的动态变化特点。3.通过实验研究探讨黄连解毒汤干预PSCI的应用时机及部分相关机制,并进一步讨论“毒损脑络”理论对于PSCI病机的合理性。方法1.参考大数据分析结果及“SDSVD量表”中的症状要素,对入选的123例PSCI患者,参考“一般病证+严重、秽浊、迁延邪气”原则制定“PSCI中医毒邪症状要素表”并进行“毒邪”分类,并采用“SDSVD量表”进行中医辨证分型,分析各类毒邪与各中医证型、非特异性症状、发病危险因素、实验室检查（CRP、NSE、D-D、FIB、Hcy）、TOSAT分型、影像学特征（侧支代偿、梗死部位、脑灌注）及认知功能等方面的分布特征及相关性,并从毒邪相兼情况及热性症状存在情况,评价PSCI相关“毒邪”分类方法的临床基础,分析毒邪的共同特性。分布率的比较采用?2检验,相关性分析采用Pearson相关性及Logistic回归分析。2.将60例PSCIND患者随机分为两组,对照组29例行西医基础治疗,治疗组31例加用黄连解毒汤,比较两组治疗前与治疗后1周、1月、3月、6月的MMSE、Mo CA、NIHSS、ADL、中医证候评分,比较两组治疗前与治疗后1周、1月的CRP、NSE、D-D、FIB、Hcy值,对治疗后1月、6月的疗效进行相关因素分析,总结分析“毒邪”的动态变化特点。计数资料根据方差检验情况行t检验或秩和检验,疗效相关性分析采用二元Logistic回归分析。3.将多发性脑梗死动物模型随机分为5组:假手术组、24h模型对照组、7d模型对照组、24h黄连解毒汤组、7d黄连解毒汤组。给药28天后对比观察其水迷宫检测结果以了解其认知功能,光镜观察梗死及周围区病理,CD34标记MVD,WB法测Notch信号通路Notch1、Jagged2、Hes1、Stat3蛋白及VEGF蛋白含量,ELISA法检测IL-6、IL-1β、TNF-β、IL-4、IL-10表达情况。各组之间的比较采用单因素方差（one-way ANOVA）分析。结果1.据“PSCI中医毒邪症状要素表”毒邪分类为热毒、痰毒、瘀毒、腑滞浊毒、正虚蕴毒。经Pearson相关性检验,各中医证型与各毒邪分布具有线性相关。Logistic回归分析发现,热毒与无多次脑梗死、无高血压、有糖尿病、侧支代偿差、CRP升高、嗜睡相关;痰毒与卒中到PSCI时间短、高脂血症、侧支代偿差、NSE升高相关;瘀毒与有高血压、吸烟、饮酒、小血管或前循环大血管病变、D-D及FIB升高有关;腑滞浊毒与侧支代偿差、CRP升高、嗜睡有关;正虚蕴毒与卒中到PSCI时间短、Hcy升高有关。整体毒邪与侧支代偿差、卒中到PSCI时间短、CRP升高、Hcy升高有关。各类“毒邪”相互交织,热象存在率平均达79.60%,提示各类“毒邪”存在共性及整体统一性。2.黄连解毒汤治疗PSCIND,在MMSE及Mo CA评分方面治疗组起效更早,可显着提高ADL评分（p<0.05）。对热毒内盛、痰浊阻络、腑滞浊留、气血不足证候评分可在治疗早期产生更积极作用（p<0.05）,可防阴虚阳亢证进一步加重。治疗组在CRP、NSE、D-D方面的改善作用更明显（p<0.05）。二元Logistic回归分析发现,治疗后1月有效性与采用黄连解毒汤,降低热毒内盛评分及清除热毒相关,同时与CRP、NSE值降低、ADL值降低相关。治疗后6月有效性与采用黄连解毒汤、总体毒邪被清除ADL值降低有关。3.动物实验研究结果,在认知功能行为学方面24h及7d黄连解毒汤组定位航行及空间探索能力优于各模型对照组（p<0.05）,24h黄连解毒汤组优于7d黄连解毒汤组（p<0.05）。24h黄连解毒汤组梗死及周围区存活细胞密度相对较高。各黄连解毒汤组在大脑皮层Notch1、Jagged2、Hes1、STAT3蛋白及IL-6、IL-1β、TNF-α、IL-4、IL-10表达改善作用均优于各模型对照组（p<0.05）。24h黄连解毒汤组在Hes1蛋白、IL-6、IL-4的表达优于7d黄连解毒汤组（p<0.05）。各黄连解毒汤组与对照模型组VEGF表达无明显差异（p>0.05）。24h黄连解毒汤组脑组织MVD显着优于7d黄连解毒汤组（p<0.05）。结论1.对毒邪的分类研究发现,各类毒邪在中医辨证分型、非特异性症状、TOSAT分型、实验室指标、影像学特征方面的分布具有一定的趋向性和相关性。多数毒邪相互交织存在,多数存在热性症状,具有整体统一性,采用黄连解毒汤早期干预PSCI具有可行性。2.采用黄连解毒汤干预PSCICN患者可对患者血CRP、NSE、D-D等及中医证候评分产生积极影响,可改善患者认知功能;黄连解毒汤对其整体毒邪具有清除作用,不单纯局限于热毒。其毒邪动态变化特点进一步反应了毒邪的整体性,也反应了随着病情发展进行“辨证论治”的必要性。3.在缺血性卒中急性期,尽早使用黄连解毒汤可减轻多发性脑梗死动脉模型大鼠的认知功能行为学损害,其部分机制是通过抑制Notch信号通路的激活、调节炎性因子及改善梗死周围区域微循环而实现的。“毒损脑络”理论反应了PSCI的病机特点,也反应了PSCI的“防”与“治”的整体一致性。
高炎[10]（2021）在《黄连解毒汤治疗阿尔茨海默病的临床观察及实验研究》文中提出目的:阿尔兹海默病（Alzeimer disease,AD）以起病隐匿、进行性认知功能损害为特征,属神经系统变性疾病,给患者生存质量及生命健康带来严重危害,目前我国老龄人口逐渐增加,AD的患病人数也逐年上升,药物治疗可改善AD患者临床症状,但不能彻底阻断其病程发展,服药疗程较长。既往临床研究结果显示,黄连解毒汤对AD具有治疗作用,在实验研究方面,黄连解毒汤对AD模型小鼠具有抑制AD特征性病理改变,下调炎性因子表达等作用效应。本研究采用单中心、随机、阳性药物对照、非劣效性设计,以多奈哌齐为对照药物,通过整体认知功能、日常生活活动能力、生活质量、中医证候方面综合评价黄连解毒汤对AD的疗效,通过观察不同时间点疗效以及不同时间段的疗效维持效应,分析黄连解毒汤治疗AD的时效特征。通过分析中医证候要素与整体认知功能、日常生活活动能力、生活质量的相关性,从现代医学角度理解AD患者中医证候的临床意义。为中医诊疗AD及应用黄连解毒汤治疗AD提供研究依据。本研究从学习记忆能力、Aβ及相关炎性因子、组织病理表现、小胶质细胞活化状态、NLRP3炎性小体相关蛋白及基因表达多层面观察黄连解毒汤对AD模型小鼠的作用效应,探讨黄连解毒汤干预AD的可能性机制。方法:1.临床观察:本研究收集符合纳入标准的50例AD患者,研究过程包含筛选AD患者、基线评价、随机分组、治疗阶段（12周）、随访阶段（12周）。经筛选后的AD患者随机分为试验组和对照组,均进行基线评价,评估可比性。在治疗阶段,对照组用多奈哌齐治疗,试验组用黄连解毒汤治疗。在随访阶段,停用黄连解毒汤和多奈哌齐。在疗效评价的指标方面,主要观察指标为MMSE量表与ADAS-Cog量表的评分以评价整体认知功能,ADL量表评分评价日常生活活动能力,QOL-AD量表评分评价生活质量,次要观察指标为PES-D/11量表评分评价中医证候要素分布及程度。分别比较两组患者主要观察指标在治疗后各时间点（入组第4、8、12、16、20、24周）与治疗前的差异,并分析同一时间点两组患者主要观察指标的组间差异。分析两组患者于入组第12周至第16周、入组第16周至第20周、入组第20周至第24周的主要观察指标差异率,进而比较两组疗效维持效应的差异。通过分析PES-D/11量表评分与MMSE、ADAS-Cog、ADL、QOL-AD量表评分的相关性,探讨中医证候要素与整体认知功能、日常生活活动能力、生活质量的相关性。比较两组患者次要观察指标于入组第12周的组间差异,观察黄连解毒汤与多奈哌齐对中医证候的影响并分析疗效差异。最后对两组服药的安全性以及依从性进行评价。2.实验研究:本实验以9月龄Tau/APP/PS1三转基因的AD模型小鼠为研究对象,随机分为模型组、多奈哌齐组、黄连解毒汤（Huanglian Jiedu Decoction,HLJDT）大剂量组、黄连解毒汤中剂量组、黄连解毒汤小剂量组。模型组予以羧甲基纤维素钠溶液,多奈哌齐组予以盐酸多奈哌齐片溶液,黄连解毒汤大、中、小剂量组分别予以865mg·kg-1·d-1、433mg·kg-1·d-1、216mg·kg-1·d-1不同浓度的黄连解毒汤提取物溶液,均灌胃给药3个月。实验一应用Morris水迷宫实验评价五组小鼠的学习能力与记忆能力。实验二通过ELISA法检测五组小鼠海马组织中可溶性及不可溶性的Aβ 1-40及Aβ 1-42、IL-1 β、IL-18的表达水平。实验三运用HE染色法观察五组小鼠海马CA1区的组织形态改变,用免疫组化方法观察五组小鼠海马CA1区的小胶质细胞形态及活化的小胶质细胞数量。实验四通过免疫印迹法检测五组小鼠海马组织NLRP3、ASC、Pro-caspase-1、Caspase-1 p20的蛋白表达量,采用实时荧光定量PCR检测五组小鼠海马组织NLRP3、ASC、Caspase-1的mRNA表达水平。结果:1.临床观察（1）患者招募情况本研究纳入AD患者50例,脱落8例,最终完成研究患者42例,试验组21例,对照组21例。（2）基线资料试验组与对照组患者治疗前在一般资料、痴呆评价相关量表评分、中医证候要素分布及证候程度、神经影像学评分方面,组间无统计学差异（P>0.05）。（3）各时间点疗效指标比较在MMSE量表评分方面,试验组与对照组于入组第4、8、20、24周的评分较治疗前无统计学差异（P>0.05）,两组于入组第12、16周的评分较治疗前增加（P<0.05）,入组第4、8、12、16、20、24周试验组与对照组评分的组间比较均无统计学差异（P>0.05）。在ADAS-Cog量表评分方面,试验组与对照组于入组第4、8、20、24周的评分较治疗前无统计学差异（P>0.05）,两组于入组第12、16周的评分较治疗前降低（P<0.05）,入组第4、8、12、16、20、24周试验组与对照组评分的组间比较均无统计学差异（P>0.05）。在ADL量表评分方面,试验组于入组第4、8、20、24周的评分较治疗前无统计学差异（P>0.05）,对照组于入组第4、8、16、20、24周的评分较治疗前无统计学差异（P>0.05）,试验组于入组第12、16周的评分较治疗前降低（P<0.05）,对照组于入组第12周的评分较治疗前降低（P<0.05）,入组第4、8、12、16、20、24周试验组与对照组评分的组间比较均无统计学差异（P>0.05）。在QOL-AD量表评分方面,试验组于入组第4、20、24周的评分较治疗前无统计学差异（P>0.05）,对照组于入组第4、8、20、24周的评分较治疗前无统计学差异（P>0.05）,试验组于入组第8、12、16周的评分较治疗前评分升高（P<0.05）,对照组于入组第12、16周的评分较治疗前评分升高（P<0.05）,入组第4、8、12、16、20、24周试验组与对照组评分的组间比较均无统计学差异（P>0.05）。重复测量数据的方差分析结果显示时间因素影响两组患者的MMSE、ADAS-Cog、ADL、QOL-AD评分。两组MMSE、QOL-AD评分在时间与组别间不存在交互效应,两组ADAS-Cog、ADL评分在时间与组别间存在交互效应。在MMSE、ADAS-Cog、ADL、QOL-AD评分方面,作为主体内差异因素的各时间点,其评分间有统计学差异（P<0.05）,作为主体间差异因素的两治疗方法,其评分间无统计学差异（P>0.05）。MMSE、QOL-AD评分随两组治疗时间的延长而增加,均在入组第12周升至最高水平。ADAS-cog、ADL评分随两组治疗时间的延长而降低,均在入组第12周降至最低水平。疗程结束后两组MMSE、QOL-AD评分出现降低,ADAS-cog、ADL评分出现升高。（4）疗效的维持效应入组第12周至第16周试验组与对照组ADL、QOL-AD评分差异率的组间比较有统计学差异（P<0.05）,显示试验组的疗效维持效应优于对照组,而同时间段MMSE、ADAS-cog评分差异率的组间比较无统计学差异（P>0.05）;入组第16周至第20周以及入组第20周至第24周试验组与对照组MMSE、ADAS-cog、ADL、QOL-AD评分差异率的组间比较均无统计学差异（P>0.05）。（5）中医证候要素与认知功能、日常生活活动能力、生活质量的相关性Spearman相关系数分析结果显示髓减、毒盛积分与MMSE评分呈负相关（r=-0.31,P=0.04;r=-0.33,P=0.03）,肾虚、毒盛积分与 ADAS-Cog评分呈正相关（r=0.39,P=0.01;r=0.31,P=0.04）。髓减、毒盛积分与ADL 评分呈正相关（r=0.35,P=0.02;r=0.32,P=0.04）。肾虚、痰浊、毒盛积分与QOL-AD评分呈负相关（r=-0.35,P=0.03;r=-0.36,P=0.02;r=-0.32,P=0.04）。（6）黄连解毒汤对中医证候要素的影响与治疗前比较,试验组治疗结束后（入组第12周）阳亢证、火毒证、痰浊证的积分均降低（P<0.05）,对照组治疗结束后（入组第12周）肾虚证、气虚证、血虚证、髓减证、血瘀证、阳亢证、痰浊证、火毒证的积分均无显着改变（P>0.05）。于两组治疗结束后（入组第12周）,试验组阳亢证、火毒证的积分均较对照组降低（P<0.05）,而两组肾虚证、气虚证、血虚证、髓减证、痰浊证、血瘀证积分无统计学差异（P>0.05）。（7）安全性观察两组患者于入组、治疗、随访期间的安全性相关实验室指标均未发生异常。不良反应方面,对照组恶心1例,试验组腹胀2例,均为轻度。两组不良反应发生率无统计学差异（P>0.05）。（8）依从性观察试验组服药依从率为85.71%（18/21）,对照组为80.95%（17/21）,两组服药依从率无统计学差异（P>0.05）。2.实验研究（1）黄连解毒汤对AD模型小鼠学习记忆能力的影响在前4天训练期以及第5天的定位航行实验中,5组小鼠的逃避潜伏期与游泳总路程逐渐缩短。第5天定位航行实验结果显示,与模型组相比,多奈哌齐组、HLJDT大剂量组、HLJDT中剂量组的逃避潜伏期均显着减少（P<0.01）,HLJDT小剂量组的逃避潜伏期也较模型组减少（P<0.05）,多奈哌齐组与HLJDT大、中、小剂量组的游泳总路程均较模型组减少（P<0.05）。空间探索实验结果显示,多奈哌齐组、HLJDT大剂量组及中剂量组的穿越平台次数与目标象限时间比均较模型组显着增加（P<0.01）,第一次抵达原平台时间均较模型组显着减少（P<0.01）。HLJDT小剂量组的穿越平台次数与目标象限时间比均较模型组增加（P<0.05）,HLJDT小剂量组的第一次抵达平台时间较模型组减少（P<0.05）。（2）黄连解毒汤对AD模型小鼠海马Aβ及相关炎性因子表达的影响在小鼠海马的A β 1-40及Aβ 1-42表达水平方面,与模型组相比,HLJDT大、中、小剂量组的可溶性与不可溶性Aβ 1-40、可溶性与不可溶性Aβ 1-42、总A β 1-40、总Aβ 1-42均显着降低（P<0.01）,多奈哌齐组的不可溶性A β 1-40表达降低（P<0.05）,多奈哌齐组的可溶性与不可溶性Aβ 1-42、可溶性A β 1-40、总Aβ 1-40、总Aβ 1-42的表达量显着降低（P<0.01）;与多奈哌齐组相比,HLJDT大剂量组的可溶性与不可溶性A β 1-40、可溶性与不可溶性A β 1-42、总A β 1-42表达量均降低（P<0.05）,HLJDT大剂量组的总A β 1-40表达水平显着降低（P<0.01）。HLJDT中剂量组的可溶性与不可溶性A β 1-40、可溶性与不可溶性Aβ 1-42、总Aβ 1-40、总A β 1-42表达量均较多奈哌齐组降低（P<0.05）;与HLJDT小剂量组相比,HLJDT大剂量组的可溶性A β 1-40和总A β 1-40表达量降低（P<0.05,P<0.01）,HLJDT中剂量组的可溶性A β 1-40和总Aβ 1-40表达量降低（P<0.05）。在小鼠海马IL-1 β表达量方面,HLJDT大、中、小剂量组与多奈哌齐组的表达量均较模型组降低（P<0.05）。在小鼠海马IL-18表达量方面,HLJDT大、中、小剂量组与多奈哌齐组的表达量均较模型组显着降低（P<0.01）,HLJDT大剂量组、HLJDT中剂量组的表达量均较多奈哌齐组降低（P<0.05）,HLJDT大剂量组、HLJDT中剂量组的表达量均较HLJDT小剂量组降低（P<0.05）。（3）黄连解毒汤对AD模型小鼠海马组织形态学及小胶质细胞活化情况的影响海马CA1区HE染色结果显示,模型组细胞层次减少,组织结构松散,排列紊乱,轮廓不清,神经细胞肿胀,部分细胞有空泡变性或固缩坏死。多奈哌齐组、HLJDT大剂量组、HLJDT中剂量组、HLJDT小剂量组的海马CA1区形态学表现较模型组改善,椎体细胞排列较整齐,组织结构更清晰,空泡变性或固缩坏死的细胞更少。在海马CA1区神经元总数目方面,HLJDT大剂量组、HLJDT中剂量组较模型组显着增加（P<0.01）,多奈哌齐组、HLJDT小剂量组较模型组增加（P<0.05）。海马CA1区免疫组化结果显示,模型组小胶质细胞为活化状态,呈阿米巴状。多奈哌齐组、HLJDT大、中、小剂量组均较模型组的小胶质细胞体积小,染色浅,细胞突起长,活化的小胶质细胞数量减少。在活化小胶质细胞数量方面,HLJDT大剂量组、HLJDT中剂量组较模型组显着减少（P<0.01）,多奈哌齐组、HLJDT小剂量组较模型组减少（P<0.05）,HLJDT大剂量组、HLJDT中剂量组较多奈哌齐组减少（P<0.05）。（4）黄连解毒汤对海马NLRP3炎性小体相关蛋白及mRNA表达的影响免疫印迹法检测结果显示,多奈哌齐组及HLJDT大、中、小剂量组海马NALRP3、ASC、Caspase-1 p20的蛋白表达水平均较模型组显着降低（P<0.01）;多奈哌齐组、HLJDT大剂量组、HLJDT中剂量组海马NALRP3、ASC、Caspase-1 p20的蛋白表达水平均较HLJDT小剂量组降低（P<0.05）;五组海马Pro-caspase-1蛋白表达无统计学差异（P>0.05）。实时荧光定量PCR检测结果显示,多奈哌齐组与HLJDT大、中、小剂量组海马NLRP3、ASC、Caspase-1的mRNA表达较模型组显着降低（P<0.01）。其余组间NLRP3、ASC、Caspase-1的mRNA表达均无统计学差异（P>0.05）。结论:1.经临床观察认为,黄连解毒汤治疗AD患者可改善整体认知功能、日常生活活动能力、生活质量。与多奈哌齐相比,黄连解毒汤在改善生活质量方面起效时间更早,在改善日常生活活动能力以及生活质量的疗效维持效应方面优于多奈哌齐。AD患者肾虚、髓减、毒盛与整体认知功能,髓减、毒盛与日常生活能力,毒盛、痰浊与生活质量均存在相关性。黄连解毒汤可有效减轻AD患者阳亢证、火毒证、痰浊证的严重程度,对阳亢证、火毒证的改善作用优于多奈哌齐。黄连解毒汤在服药安全性与患者依从性方面表现良好。2.实验研究表明黄连解毒汤对Tau/APP/PS1三转基因小鼠的学习记忆能力具有改善作用,可下调海马可溶性与不可溶性Aβ 1-40、总Aβ 1-40、可溶性与不可溶性A β 1-42、总A β 1-42以及IL-18、IL-1 β的表达水平,可减轻海马的组织病理损害,对海马小胶质细胞的活化状态具有抑制作用,可下调海马 NLRP3、ASC、Caspase-1 p20 蛋白以及 NLRP3、ASC、Caspase-1 mRNA的表达水平。在不同剂量黄连解毒汤的作用差异方面,大剂量组与中剂量组对海马可溶性A β 1-40、总Aβ 1-40、IL-18表达的抑制作用以及对海马NLRP3、ASC、Caspase-1 p20蛋白表达的下调作用均优于小剂量。上述实验结果提示黄连解毒汤改善Tau/APP/PS1三转基因小鼠的学习记忆能力可能与其抑制海马NLRP3炎性小体相关蛋白及基因表达、调节小胶质细胞活化状态、抑制神经炎症、保护神经元的作用有关。
二、补肾活血方对拟血管性痴呆小鼠智力及其肝脏一氧化氮、超氧化物歧化酶及丙二醛的影响（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、补肾活血方对拟血管性痴呆小鼠智力及其肝脏一氧化氮、超氧化物歧化酶及丙二醛的影响（论文提纲范文）
（1）miR-19b-3p、MnSOD、NO/ET-1与脑梗死后血管性痴呆预测效能（论文提纲范文）
| 1 资料与方法 |
| 1.1 一般资料 |
| 1.2 方法 |
| 1.2.1 治疗方法 |
| 1.2.2 治疗前和出院时生化指标检测 |
| 1.2.3 简易智力状态检查量表（MMSE）评分[8] |
| 1.3 统计学处理 |
| 2 结果 |
| 2.1 VaD发生情况 |
| 2.2 两组基线资料比较 |
| 2.3 两组miR-19b-3p、MnSOD、NO/ET-1、MMSE评分比较 |
| 2.4 miR-19b-3p、MnSOD、NO/ET-1与MMSE评分相关性 |
| 2.5 偏相关性分析 |
| 2.6 miR-19b-3p、MnSOD、NO/ET-1的预测效能 |
| 3 讨论 |
（2）益气活血法理论溯源及代表方补阳还五汤治疗脑病的meta分析（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 第一部分 基于中医古籍研究“益气活血”历史源流及运用 |
| 1 研究目的与意义 |
| 2 研究对象与方法 |
| 3 古籍检索 |
| 4 研究结果 |
| 5 益气活血法源流总结 |
| 6 益气活血法运用探讨 |
| 7 结论 |
| 第二部分 益气活血法代表方补阳还五汤治疗脑病的meta分析 |
| 1 资料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 综述 益气活血法对脑病的研究概述 |
| 参考文献 |
| 作者简介 |
| 致谢 |
（3）朝医清心山药汤对血管性痴呆大鼠认知功能改善作用的实验研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 英文缩略词表 |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 血管性痴呆的研究进展 |
| 1.1.1 中医对VD的认识 |
| 1.1.2 中医治疗VD |
| 1.1.3 VD的危险因素、发病机制、西医治疗方法 |
| 1.2 总结 |
| 第二章 实验材料及方法 |
| 2.1 实验药品及试剂 |
| 2.2 实验动物 |
| 2.3 实验器材 |
| 2.4 实验试剂溶液配制 |
| 2.5 实验方法 |
| 2.5.1 实验动物分组 |
| 2.5.2 提取物的配制 |
| 2.5.3 动物模型的制备 |
| 2.5.4 体重测定 |
| 2.5.5 Morris 水迷宫实验 |
| 2.5.6 血清的采集与取大鼠脑组织中的海马 |
| 2.5.7 石蜡包埋和切片 |
| 2.5.8 HE染色 |
| 2.5.9 酶联免疫吸附法(ELISA) |
| 2.5.10 检测VD大鼠脑组织中NO含量 |
| 2.5.11 检测 VD 大鼠脑 BDNF 表达 |
| 2.5.12 统计学方法 |
| 第三章 实验结果 |
| 3.1 清心山药汤对大鼠体重的影响 |
| 3.2 清心山药汤对VD大鼠学习记忆功能的影响 |
| 3.3 清心山药汤对 VD 大鼠海马组织病理形态学变化的影响（HE染色） |
| 3.4 清心山药汤对VD大鼠血清中Ach E、5-HT含量的影响 |
| 3.4.1 清心山药汤对VD大鼠血清中Ach E含量的影响 |
| 3.4.2 清心山药汤对VD大鼠血清中5-HT含量的影响 |
| 3.5 清心山药汤对VD大鼠脑组织中NO含量的影响 |
| 3.6 清心山药汤对VD大鼠脑BDNF表达的影响 |
| 第四章 讨论 |
| 第五章 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（4）解毒益智方对阿尔茨海默病双转基因小鼠行为学及大脑皮层内β-淀粉样蛋白沉积及BACE1表达影响的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略语 |
| 引言 |
| 文献综述 |
| 综述一 AD的病因病机及治疗进展 |
| 1 中医学对痴呆的系统认识及研究进展 |
| 1.1 中医学对痴呆病名由来及发展的认识 |
| 1.2 中医学对痴呆病因病机的古代认识 |
| 1.3 中医学对痴呆辨证论治及相关研究的认识 |
| 1.4 中医学对痴呆治疗的古今认识 |
| 综述二 西医学对AD的发病机制及治疗进展研究 |
| 1 现代医学对AD的认识及研究进展 |
| 1.1 AD的概述及流行病学 |
| 1.2 现代医学对AD发病因素的认识及研究 |
| 1.3 现代医学对AD发病相关机制的认识 |
| 2 现代医学对AD治疗的认识 |
| 2.1 乙酰胆碱酯酶抑制剂(AchEIs) |
| 2.2 兴奋性氨基酸受体拮抗剂 |
| 2.3 甘露特纳胶囊 |
| 2.4 其他非药物治疗 |
| 3 问题与展望 |
| 综述三 Aβ在脑内异常沉积的机制 |
| 1.Aβ的产生、分布与清除、传递与运输的研究进展 |
| 1.1 Aβ的产生 |
| 2 Aβ的清除 |
| 2.1 细胞的清除作用 |
| 2.2 Aβ被降解酶的清除作用 |
| 2.3 中枢Aβ的清除途径 |
| 2.4 血液成分介导的Aβ清除 |
| 综述四 解毒益智方在阿尔茨海默病中的应用 |
| 1 解毒益智方的创立 |
| 1.1 脑髓理论 |
| 1.2 髓虚毒损 |
| 1.3 补肾益髓,活血化痰解毒法 |
| 2 解毒益智方通过调节SIRT1/AMPK通路抑制BACE1表达改善Aβ的沉积 |
| 3 解毒益智方对阿尔茨海默病的临床应用 |
| 实验研究 |
| 第一章 CCP对Aβ25-35诱导的PC12细胞损伤保护性的研究 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 第二章 JDYZF对APP/PS1双转基因小鼠行为学的研究 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 第三章 JDYZF对APP/PS1双转基因小鼠脑内Aβ水平变化的影响 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 第四章 JDYZF对APP/PS1双转基因小鼠脑内BACE1表达的影响 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 结论 |
| 本文创新点 |
| 参考文献 |
| 附录1 |
| 致谢 |
| 在学期间主要研究成果 |
| 个人简介 |
（5）眼区电针治疗血管性痴呆的临床研究（论文提纲范文）
| 缩略语表 |
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 引言 |
| 文献综述 |
| 1.祖国医学对血管性痴呆的研究 |
| 1.1 祖国医学对血管性痴呆病名的认识 |
| 1.2 祖国医学对血管性痴呆病因病机的认识 |
| 1.3 祖国医学对血管性痴呆治疗的认识 |
| 2.现代医学对血管性痴呆的研究 |
| 2.1 血管性痴呆的危险因素 |
| 2.2 血管性痴呆的发病机制 |
| 2.3 血管性痴呆的现代医学治疗 |
| 临床研究 |
| 1.临床资料 |
| 1.1 病例来源 |
| 1.2 诊断标准 |
| 1.3 纳入标准 |
| 1.4 排除标准 |
| 1.5 剔除标准 |
| 1.6 脱落标准 |
| 1.7 中止标准 |
| 2.研究方法 |
| 2.1 样本量估算及分组方案 |
| 2.2 主要设备 |
| 2.3 治疗方法 |
| 2.4 临床评价方法 |
| 2.5 统计方法 |
| 2.6 异常情况的预防及处理 |
| 3.结果分析 |
| 3.1 基线资料分析 |
| 3.2 临床疗效评价 |
| 3.3 两组患者MMSE量表评分比较 |
| 3.4 两组患者ADL量表评分比较 |
| 3.5 两组患者SDSVD量表评分比较 |
| 3.6 两组患者ADAS-cog量表评分比较 |
| 讨论 |
| 1.选题依据 |
| 2.眼针选穴依据 |
| 3.眼区电针疗法的理论依据 |
| 3.1 眼针疗法的理论依据 |
| 3.2 电针疗法的理论依据 |
| 3.3 眼区电针疗法的理论依据 |
| 4.量表的选择 |
| 5.疗效分析 |
| 5.1 临床疗效 |
| 5.2 两组患者MMSE量表评分结果比较 |
| 5.3 两组患者ADL量表评分结果比较 |
| 5.4 两组患者SDSVD量表评分结果比较 |
| 5.5 两组患者ADAS-cog量表评分结果比较 |
| 6.问题与展望 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 攻读硕士期间发表的论文 |
| 个人简历 |
（6）戟天健脑方调节低糖低氧下大鼠海马神经细胞突触可塑性的机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 符号说明 |
| 文献综述一 血管性痴呆的危险因素及病理机制 |
| 1 VD的危险因素 |
| 1.1 动脉粥样硬化性疾病或血管危险 |
| 1.2 其他因素 |
| 2 VD的病理机制 |
| 2.1 胆碱能神经系统 |
| 2.2 突触可塑性的改变 |
| 2.3 氧化应激和炎性反应 |
| 2.4 遗传机制 |
| 参考文献 |
| 文献综述二 血管性痴呆的中西医治疗进展 |
| 1 中药治疗 |
| 1.1 中药复方 |
| 1.2 中药单味药 |
| 1.3 传统特色治疗 |
| 2 西药治疗 |
| 3 中西医结合 |
| 参考文献 |
| 前言 |
| 1 材料与仪器 |
| 1.1 动物 |
| 1.2 药物与试剂 |
| 1.3 仪器 |
| 1.4 试剂配制 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 大鼠海马神经元细胞原代培养 |
| 2.2 细胞鉴定 |
| 2.3 大鼠海马神经元细胞低糖低氧模型建立及干预方法 |
| 2.4 戟天健脑方对各组细胞造模前后形态影响 |
| 2.5 戟天健脑方对各组细胞PSD-95、MecP2、p250GAP蛋白表达的影响 |
| 2.6 miR-132基因转染及造模干预 |
| 2.7 戟天健脑方及miR-132相关转染对各组细胞GAP-43、Syn蛋白荧光表达的影响 |
| 2.8 戟天健脑方及miR-132相关转染对各组细胞CREB、BDNF含量的影响 |
| 2.9 统计学方法 |
| 3 结果 |
| 3.1 细胞鉴定结果 |
| 3.2 戟天健脑方对各组细胞形态影响 |
| 3.3 戟天健脑方对各组细胞PSD-95、MecP2、p250GAP蛋白表达的影响 |
| 3.4 戟天健脑方及miR-132相关转染对各组细胞GAP-43、Syn蛋白荧光表达的影响 |
| 3.5 戟天健脑方及miR-132相关转染对各组细胞中CREB、BDNF含量影响 |
| 4 讨论 |
| 4.1 海马神经元细胞低糖低氧模型的建立 |
| 4.2 戟天健脑方组方分析 |
| 4.3 戟天健脑方对miR-132相关网络的干预作用 |
| 4.4 戟天健脑方和miR-132对突触可塑性的调节 |
| 5 结论 |
| 不足与展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 在学期间主要研究成果 |
（7）补脾醒神益智法对脾虚认知功能障碍大鼠TREM2/NF-κb信号通路作用机制的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 英文缩略词表 |
| 前言 |
| 第一部分 理论研究 从脾论治认知功能障碍中医相关理论探讨 |
| 第二部分 实验研究 |
| 实验一: 补脾醒神益智方对脾虚认知功能障碍模型大鼠学习记忆能力的影响 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 实验二: 补脾醒神益智方对Aβ诱导的脾虚认知功能障碍大鼠形态学及血清IL-1β、IL-6以及TNF-α表达的影响 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 实验三: 补脾醒神益智方对脾虚认知功能障碍大鼠脑组织的TREM2/NF-κB信号通路的影响 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 结论 |
| 本研究创新性的自我评价 |
| 参考文献 |
| 综述 中医药防治认知功能障碍研究进展 |
| 参考文献 |
| 个人简介 |
| 在学期间科研成绩 |
| 致谢 |
（8）基于线粒体相关蛋白通路探讨参麻益智方对血管性认知障碍大鼠的作用机制（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略词表 |
| 文献综述 |
| 综述一 线粒体能量代谢关键蛋白在认知障碍中的作用机制 |
| 1 能量代谢相关通路在认知障碍中的作用 |
| 2 线粒体能量代谢相关的关键蛋白在认知障碍中的作用 |
| 参考文献 |
| 综述二 基于中医“虚、瘀、毒”病机探讨能量代谢异常和血管性认知障碍的相互关系 |
| 1 中医“虚、瘀、毒”与血管性认知障碍的关系 |
| 2 中医“虚、瘀、毒”与能量代谢障碍的关系 |
| 3 脑的能量代谢与血管性认知障碍的关系 |
| 4 改善线粒体能量代谢治疗血管性认知障碍的中药复方研究 |
| 参考文献 |
| 实验研究 |
| 前言 |
| 实验一 参麻益智方的提取方法和主要化学成分分析 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 小结 |
| 实验二 参麻益智方对慢性脑缺血致血管性认知障碍大鼠学习记忆能力的影响 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 小结 |
| 实验三 参麻益智方对慢性脑缺血致认知障碍模型大鼠脑组织线粒体障碍相关蛋白的机制研究 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 小结 |
| 讨论 |
| 1 参麻益智方的组方特点和前期研究成果 |
| 2 慢性脑低灌注致血管性认知功能障碍大鼠模型 |
| 3 参麻益智方改善血管性认知障碍大鼠学习记忆功能 |
| 4 参麻益智方对血管性认知障碍大鼠线粒体数量和结构的影响 |
| 5 参麻益智方对线粒体关键蛋白能量代谢的影响 |
| 6 线粒体能量代谢的中医认识 |
| 参考文献 |
| 结论 |
| 创新点 |
| 不足与展望 |
| 致谢 |
| 个人简介 |
| 附件 |
（9）基于“毒损脑络”理论黄连解毒汤早期干预卒中后认知障碍的临床及实验研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 中英文缩略词表 |
| 前言 |
| 第一部分:对PSCI相关中医“毒邪”分类的研究 |
| 引言 |
| 临床资料与方法 |
| 1.研究对象 |
| 2.纳排标准 |
| 3.观察指标及研究方法 |
| 4.统计学方法 |
| 结果 |
| 1.入选患者中医证型及有关实验室指标的总体分布情况 |
| 2.各中医证型与所观察指标的分布特征及相关性分析 |
| 3.毒邪的分类与所观察指标的分布特征及相关性分析 |
| 4. 各中医证型与相应毒邪的分布特征及相关性 |
| 5. 各类毒邪相兼情况分布特征 |
| 6. 各类毒邪中热性症状存在情况 |
| 7. 各类毒邪与所观察要素的相关性分析 |
| 讨论 |
| 1.PSCI的中医证候学研究 |
| 2.对PSCI毒邪的分类定义 |
| 3.对PSCI中医证型及毒邪分类研究结果的解读及探讨 |
| 4.对于“素毒”与“新毒”的理解 |
| 5.PSCI毒邪的整体统一性及黄连解毒汤治疗的可行性 |
| 6.本研究需要进一步延伸的方向 |
| 第二部分:早期应用黄连解毒汤对PSCIND患者的疗效观察 |
| 引言 |
| 临床资料与方法 |
| 1.研究对象 |
| 2.纳排标准 |
| 3.分组情况及治疗方法 |
| 4.观察指标及研究方法 |
| 5.统计学方法 |
| 结果 |
| 1.黄连解毒汤对认知功能MMSE评分的影响 |
| 2.黄连解毒汤对认知功能MoCA评分的影响 |
| 3.黄连解毒汤对神经功能NIHSS评分的影响 |
| 4.黄连解毒汤对日常生活能力ADL评分的影响 |
| 5.黄连解毒汤对各中医证候评分的影响 |
| 6.黄连解毒汤对实验室指标的影响 |
| 7.对治疗后1 月、6 月疗效的相关因素分析 |
| 讨论 |
| 1.PSCI的治疗与“毒损脑络”学说 |
| 2.黄连解毒汤在脑血管病中的应用 |
| 3.导师组有关黄连解毒汤在认知障碍方面的研究基础 |
| 4.对神经、认知功能及ADL评分的影响作用分析 |
| 5.对各中医证候评分及有关毒邪的动态影响作用分析 |
| 6.对相关实验室指标的影响作用分析 |
| 7.本研究的意义及仍需解决的问题 |
| 第三部分:黄连解毒汤对脑梗死动物模型认知功能影响的实验研究 |
| 引言 |
| 实验动物与方法 |
| 1.实验动物 |
| 2.试剂及仪器 |
| 3.多发性脑梗死大鼠动物模型的制作 |
| 4.随机分组及给药 |
| 5.大鼠脑组织取材 |
| 6.指标检测及方法 |
| 7.统计学方法 |
| 结果 |
| 1. 各组大鼠的行为学认知功能检测 |
| 2. 各组大鼠皮层组织 HE 染色病理检查 |
| 3. 各组大鼠脑组织梗死周围区 MVD 检测 |
| 4.各组大鼠脑皮层组织Notch信号通路及VEGF蛋白检测 |
| 5.各组大鼠脑皮层组织炎性相关因子的检测 |
| 讨论 |
| 1.对PSCI发生机制的认识及所观察指标的选择 |
| 2.黄连解毒汤对于脑缺血及PSCI影响的可能机制 |
| 3.对PSCI相关信号通路的选择 |
| 4.动物造模方法的选择 |
| 5.对实验分组方法的选择 |
| 6.对实验结果的解读及分析 |
| 7.本研究的意义及有待延伸的方向 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 附录1 文献综述:“毒损脑络”学说与卒中后认知障碍 |
| 参考文献 |
| 附录2 血管性痴呆中医证候诊断量表(SDSVD) |
| 附录3 PSCI中医毒邪症状要素表 |
| 附录4 蒙特利尔认知评估量表(MoCA) |
| 附录5 简易智能精神状态检查量表(MMSE) |
| 附录6 日常生活能力(ADL)评分量表 |
| 附录7 大鼠改良神经功能缺损评分(mNSS) |
| 附录8 各组实验动物水迷宫活动轨迹图例 |
| 附录9 各组实验大鼠梗死区及梗死周围区 HE 染色病理结果 |
| 附录10 各组实验大鼠梗死区及梗死周围区微血管密度情况 |
| 在校期间发表的论文 |
| 在读期间参与的科研项目 |
| 致谢 |
（10）黄连解毒汤治疗阿尔茨海默病的临床观察及实验研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 缩略词表 |
| 前言 |
| 第一部分 研究概况 |
| 1.现代医学对AD的认识 |
| 1.1 AD的临床诊断 |
| 1.2 AD发病机制的研究进展 |
| 1.3 AD的临床药物治疗与新药研发 |
| 2.中医学对AD的认识 |
| 2.1 AD的中医病因病机 |
| 2.2 AD的毒损脑络理论 |
| 2.3 AD的中药治疗方案 |
| 3.黄连解毒汤治疗AD |
| 3.1 黄连解毒汤对AD的临床疗效 |
| 3.2 黄连解毒汤治疗AD的可能性机制 |
| 第二部分 黄连解毒汤治疗AD的临床观察 |
| 1.临床资料 |
| 1.1 一般资料 |
| 1.2 诊断标准 |
| 1.3 纳入标准 |
| 1.4 排除标准 |
| 1.5 剔除标准 |
| 1.6 脱落标准 |
| 1.7 中止试验标准 |
| 2.方法 |
| 2.1 治疗方案 |
| 2.2 观察方法和评价指标 |
| 2.3 统计学方法 |
| 3.结果 |
| 3.1 患者招募完成情况 |
| 3.2 基线资料 |
| 3.3 两组各时间点疗效指标比较 |
| 3.4 两组疗效的维持效应 |
| 3.5 中医证候要素与认知功能、日常生活活动能力、生活质量的相关性 |
| 3.6 黄连解毒汤对中医证候的影响 |
| 3.7 安全性观察 |
| 3.8 依从性观察 |
| 4.讨论 |
| 4.1 黄连解毒汤治疗AD的临床依据 |
| 4.2 黄连解毒汤的临床疗效分析 |
| 4.3 中医证候与整体认知功能、日常生活活动能力、生活质量的相关性 |
| 4.4 黄连解毒汤对AD患者的中医证候的影响 |
| 4.5 黄连解毒汤的安全性评价及依从性评价 |
| 5.小结 |
| 第三部分 黄连解毒汤干预AD模型小鼠的实验研究 |
| 实验一 黄连解毒汤对AD模型小鼠学习记忆能力的影响 |
| 1.材料与方法 |
| 1.1 实验动物及饲养环境 |
| 1.2 实验主要药物 |
| 1.3 主要实验仪器 |
| 1.4 实验方法 |
| 1.5 统计方法 |
| 2.实验结果 |
| 2.1 定位航行实验结果 |
| 2.2 空间探索实验结果 |
| 3.讨论 |
| 3.1 动物模型与水迷宫检测选择依据 |
| 3.2 黄连解毒汤对Tau/APP/PS1三转基因小鼠学习记忆的影响 |
| 4.小结 |
| 实验二 黄连解毒汤对AD模型小鼠海马组织Aβ及相关炎性因子表达的影响 |
| 1.材料与方法 |
| 1.1 实验主要仪器 |
| 1.2 实验主要试剂 |
| 1.3 实验方法 |
| 1.4 统计方法 |
| 2.实验结果 |
| 2.1 黄连解毒汤对AD小鼠海马组织Aβ1-40及Aβ1-42 水平的影响 |
| 2.2 黄连解毒汤对AD小鼠海马组织IL-1β、IL-18表达的影响 |
| 3.讨论 |
| 3.1 黄连解毒汤对AD小鼠海马组织Aβ水平的影响 |
| 3.2 黄连解毒汤对AD小鼠海马组织IL-1β、IL-18 的影响 |
| 4.小结 |
| 实验三 黄连解毒汤对AD模型小鼠海马组织形态学及小胶质细胞活化情况的影响 |
| 1.材料与方法 |
| 1.1 主要实验仪器 |
| 1.2 主要实验试剂 |
| 1.3 实验动物、分组、干预方法 |
| 1.4 标本制备 |
| 1.5 苏木素-伊红(HE)染色的主要操作步骤 |
| 1.6 免疫组化(IHC)方法的主要操作步骤 |
| 1.7 统计分析方法 |
| 2.实验结果 |
| 2.1 HE染色观察五组小鼠海马CA1区组织形态 |
| 2.2 免疫组化观察五组小鼠海马CA1区小胶质细胞活化情况 |
| 3.讨论 |
| 3.1 黄连解毒汤对AD小鼠海马组织形态的保护作用 |
| 3.2 黄连解毒汤对AD小鼠海马小胶质细胞活化的调节作用 |
| 4.小结 |
| 实验四 黄连解毒汤对AD模型小鼠海马NLRP3 炎性小体相关蛋白及mRNA表达的影响 |
| 1.材料与方法 |
| 1.1 主要仪器与设备 |
| 1.2 主要实验试剂 |
| 1.3 实验动物、分组、干预方法 |
| 1.4 标本制备 |
| 1.5 指标检测 |
| 1.6 统计方法 |
| 2.实验结果 |
| 2.1 黄连解毒汤对AD小鼠海马组织NLRP3、ASC、Pro-caspase-1、Caspase-1 p20蛋白表达的影响 |
| 2.2 黄连解毒汤对AD小鼠海马组织NLRP3、ASC、Caspase-1mRNA表达的影响 |
| 3.讨论 |
| 3.1 NLRP3/ASC/Caspase-1在AD病理机制中的作用 |
| 3.2 黄连解毒汤对Tau/APP/PS1小鼠海马NLRP3炎性小体相关蛋白及mRNA表达的影响 |
| 4.小结 |
| 第四部分 结语 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 综述 小胶质细胞与NLRP3炎性小体在阿尔茨海默病病理过程中的作用 |
| 参考文献 |
| 在校期间公开发表的学术论文及科研成果 |
| 致谢 |
四、补肾活血方对拟血管性痴呆小鼠智力及其肝脏一氧化氮、超氧化物歧化酶及丙二醛的影响（论文参考文献）
- [1]miR-19b-3p、MnSOD、NO/ET-1与脑梗死后血管性痴呆预测效能[J]. 高华,杨嘉君,张新华. 分子诊断与治疗杂志, 2021(06)
- [2]益气活血法理论溯源及代表方补阳还五汤治疗脑病的meta分析[D]. 任思思. 山西中医药大学, 2021(09)
- [3]朝医清心山药汤对血管性痴呆大鼠认知功能改善作用的实验研究[D]. 千雪梅. 延边大学, 2021
- [4]解毒益智方对阿尔茨海默病双转基因小鼠行为学及大脑皮层内β-淀粉样蛋白沉积及BACE1表达影响的研究[D]. 朱晓婷. 长春中医药大学, 2021(01)
- [5]眼区电针治疗血管性痴呆的临床研究[D]. 王俊兰. 黑龙江省中医药科学院, 2021
- [6]戟天健脑方调节低糖低氧下大鼠海马神经细胞突触可塑性的机制研究[D]. 王添全. 北京中医药大学, 2021
- [7]补脾醒神益智法对脾虚认知功能障碍大鼠TREM2/NF-κb信号通路作用机制的研究[D]. 程越. 辽宁中医药大学, 2021
- [8]基于线粒体相关蛋白通路探讨参麻益智方对血管性认知障碍大鼠的作用机制[D]. 孙成成. 中国中医科学院, 2021
- [9]基于“毒损脑络”理论黄连解毒汤早期干预卒中后认知障碍的临床及实验研究[D]. 姜海伟. 湖北中医药大学, 2021(01)
- [10]黄连解毒汤治疗阿尔茨海默病的临床观察及实验研究[D]. 高炎. 湖北中医药大学, 2021(01)