一、贵州省三穗县猪弓形虫病流行病学调查（论文文献综述）
桂滨泽[1]（2020）在《湖南省猪弓形虫和犬新孢子虫感染情况调查及弓形虫基因型研究》文中指出
全敏秀[2]（2020）在《湖南省鸡衣原体、弓形虫感染情况调查及新城疫免疫效果监测》文中研究表明
陈世林[3]（2019）在《湖南省猪的三种人畜共患病感染情况调查》文中研究表明衣原体、弓形虫和布鲁氏菌是三种严重威胁人类和多种动物生命健康的人畜共患病的病原体。猪在这三种病原的传播中扮演着重要的角色,它是这三种病原体的共同易感宿主,对于这三种病原体所引起的人畜共患病的研究具有重要的公共卫生学意义。本研究第一部分采用间接血凝试验（IHA）对湖南省14个市（州）不同规模的猪场猪衣原体感染情况进行调查。结果显示,3848份猪血清样品中衣原体抗体的总阳性率为26.98%。按区域划分,湘南、湘北、湘中、湘西4个地区的衣原体抗体阳性率分别为25.63%、22.65%、32.78%、18.81%,局部地方以怀化最高,达61.67%;一年中,春季、夏季、秋季、冬季的抗体阳性率分别为18.97%、25.40%、42.58%、48.81%,不呈现季节性;仔猪、育肥猪、种公猪、母猪的阳性率分别为10.90%、28.64%、48.39%、33.63%,其中仔猪的阳性率最低,种公猪的阳性率最高。本次调查结果表明湖南省猪场普遍存在衣原体感染,应引起足够的重视。本研究第二部分采用间接血凝试验（IHA）对湖南省8个市（州）不同规模的猪场猪弓形虫感染情况进行调查。结果显示,1259份猪血清样品中猪弓形虫阳性样品为13份,抗体阳性率仅为1.03%,仔猪、育肥猪、种公猪、母猪均发现弓形虫感染,抗体阳性率分别为0.20%、0.28%、4.26%、2.43%,以种公猪最高。结果表明,湖南省猪弓形虫感染程度较低。本研究第三部分采用虎红平板凝集试验、试管凝集试验以及酶联免疫吸附试验对湖南省14个市（州）不同规模的猪场进行猪布鲁氏菌感染情况调查。结果显示,2344份猪血清样品虎红平板凝集试验初筛出59份抗体阳性,进一步采用试管凝集试验进行确诊,仅检测出1份育肥猪血清为阳性样品,阳性率为0.04%;采用酶联免疫吸附试验确诊,检测出2份阳性样品,阳性率为0.09%,其中1份仍是育肥猪,另1份为母猪。调查表明湖南省猪布鲁氏菌的感染率很低,基本呈零星发生,未造成大面积传播,这与湖南省采取的严厉防控措施有关,即发现1例立即销毁1例。以上研究结果对湖南省猪场三种人畜共患病的防控提供了参考。
童金水[4]（2014）在《龙岩市猪场弓形虫的血清学调查与分析》文中指出目的了解龙岩市猪弓形虫感染情况,为本地区弓形虫病的防控提供科学依据。方法采用ELISA检测弓形虫抗体。从7县市84个猪场共采集925血清。结果：1血清阳性率为23.56%（209/925）,猪场阳性为48.81%（4l/84）。2各猪群阳性率分别是,经产母猪阳性率为28.46%（148/520）最高,种公猪24.62%（16/65）次之,30日龄以内仔猪18.4%（23/125）较高,30-90仔猪阳性率12.60%（17/135）和肥育猪17.5%（14/80）较低。3存栏2000头以上为19.10%（85/445）。500头-2000头的为21.58%（82/380）。30-200头的为51%（51/100）。4大于1500米的为21.07%（75/356）,500米以内的为23.12%（89/385）,离居民区100米以内的为29.35%（54/184）。结论龙岩市弓形虫病感染率较高,今后应加强对本病的防控。
肖芳萍,徐洪忠,余波,杨茂生,任荣清,史开志[5]（2013）在《贵州人畜共患弓形虫病的流行趋势与防控措施》文中认为弓形虫病是一种严重危害人畜健康和畜牧业发展的重要的人畜共患寄生虫病。弓形虫可以感染几乎所有的温血动物。猫科动物是惟一的终末宿主,可以将含有弓形虫的卵囊排泄到环境中,而人和猪、牛、羊等草食性动物和杂食性动物则是重要的中间宿主。弓形虫病与公共卫生、人类优生优育、艾滋病和畜牧业发展有密切关系,应该引起我们极大的关注和重视。本文对弓形虫病的病原特征、生活史以及流行病学、临床症状、病理变化、诊断方法进行了概述,为贵州弓形虫病在人与家畜中的流行、诊断和防控的深入研究提供参考。
刘琨[6]（2013）在《信阳地区猪弓形虫病血清学调查与分析》文中研究说明为了解信阳地区猪弓形虫病的感染情况,于2011年5月-2012年9月,应用酶联免疫吸附试验（ELISA）方法对信阳地区部分规模养猪场进行了调查分析。结果显示:猪弓形虫病总体阳性率为23.2%,其中,经产母猪阳性率为26.2%,育肥猪阳性率为22.9%,哺乳仔猪阳性率为14.4%。由此可见,猪弓形虫病感染在信阳地区规模化猪场已普遍存在。
赵福琼,阳德华,罗德彪,徐洪忠[7]（2013）在《惠水县猪弓形虫病的诊断与防治》文中研究指明弓形虫病又叫弓形体病,是由弓形虫感染寄生于畜禽及人体引起的一种人畜共患寄生虫病。弓形虫可通过口、眼、鼻、呼吸道、肠道、皮肤等多种途径侵入猪体。主要以高热、呼吸困难、神经症状及繁殖障碍为特征。临床可见急性、亚急性和慢性3种病型,严重的可引起死亡。易被误诊为猪瘟、链球菌病、感冒、附红细胞体病等,须通过实验室诊断方能确诊。在农村散养和规模化养猪场时有发生,是养猪业的
熊冰清[8]（2012）在《猪急慢性弓形虫感染ELISA鉴别诊断方法的研究与初步应用》文中提出弓形虫病（Toxoplasmosis）是由细胞内寄生原虫龚地弓形虫（Toxoplasma gondii）引起的一种人兽共患病。弓形虫病呈世界性分布,在人、家养动物和野生动物中广泛传播,据估计全球有超过1/3的人感染弓形虫。弓形虫感染一般不表现明显的临床症状,大多数被感染者可以终生携带组织包囊而不呈现任何临床症状。然而,对一些免疫抑制病人,例如艾滋病人和恶性肿瘤患者,弓形虫感染却可以由慢性潜伏感染转化为急性感染从而引起严重的后果,甚至威胁患者的生命。人类感染弓形虫主要因为通过食物和饮水摄入了孢子化卵囊或组织包囊,而猪肉正是组织包囊最重要的肉食性来源。中国是养猪业大国,同时也是猪肉消费大国。因此迫切需要一种方法能够对携带组织包囊的牲猪进行快速的鉴别诊断,从而为弓形虫病的预防和控制创造条件。本研究利用原核表达方法获得了两种重组蛋白,即缓殖子特异性蛋白BAG1和速殖子特异性蛋白SAG1,并建立了两种间接ELISA方法rBAG1-间接ELISA和rSAG-间接ELISA。使用这两种间接ELISA方法并结合本实验已经建立的rMIC3-间接ELISA方法,可以对弓形虫慢性感染的猪进行很好的鉴别诊断。（1）通过RT-PCR扩增获得了Pru株弓形虫BAG1基因完整的CDS序列（690bp）,并构建了BAG1基因的原核表达质粒pET28a（+）-BAG1,实现了BAG1的原核表达,表达产物分子量约32kD,经Western-blot证实此表达产物能够被特异的弓形虫阳性猪血清识别,证明此原核表达产物具有良好的免疫反应性。（2）通过PCR扩增获得了RH株弓形虫SAG1基因,并构建了SAG1基因部分序列（855bp）的原核表达质粒pET28a（+）-SAG1,实现了SAG1的原核表达,表达产物分子量约35kD,经Western-blot证实此原核表达产物能够被特异的弓形虫阳性猪血清识别,证明此原核表达产物具有良好的免疫反应性。（3）建立了rBAG1-间接ELISA方法,最佳蛋白浓度1：200,最佳血清稀释度1：100,最佳BSA浓度1.00%,最佳封闭时间30mmin,最佳血清作用时间30min,最佳二抗浓度为1：7000,最佳二抗作用时间60min,阴阳性临界值为OD630=0.38。（4）构建了rSAG1-间接ELISA方法,最佳蛋白浓度1：200,最佳血清稀释度1：100,最佳BSA浓度1.00%,最佳封闭时间60mmin,最佳血清作用时间30min,最佳二抗浓度为1：6000,最佳二抗作用时间60min,阴阳性临界值为OD630=0.35。（5）利用建立的上述两种检测方法,结合实验室前期建立的rMIC3-ELISA方法对湖北省部分地区规模化猪场进行了弓形虫的血清流行病学调查,结果显示感染率高达21.00%,其中慢性感染为12.00%,急性感染为4.30%,这一结果为弓形虫的防治提供了依据。
杨明银,杨培昌,肖俊,文忠,胡自华[9]（2012）在《五种猪繁殖障碍性疾病的血清学调查与分析》文中研究表明近年来,繁殖障碍性疾病是对养猪生产危害较严重的一类疫病,它以妊娠母猪发生流产和产死胎、木乃伊胎、弱仔、畸形胎及种猪不育、配不上种为主要特征的一类疾病。根据有关资料报道,繁殖障碍性疾病主要包括温和型猪瘟、繁殖障碍与呼吸综合征、猪圆
杨振[10]（2010）在《我国部分地区水生动物弓形虫感染情况调查》文中研究说明刚第弓形虫（Toxoplasma gondii）是一种世界范围内广泛流行的专性细胞内寄生的人畜共患寄生虫病。首次发现在1908年,因其速殖子呈弓形而得名。猫科动物是其已知的唯一中间宿主,所有的温血动物都可以作为其中间宿主。弓形虫在人类上主要发生在免疫抑制人群中（HIV患者和器官移植患者等）,成年人无症状,孕妇会引起流产或产智障儿,在儿童中主要是引起弓形虫眼病和弓形虫脑病。目前全球范围内对水产品弓形虫感染的研究十分少,而我国这样的一个水产品的大国,至今仍然没有相关的研究。为了建立一种简便、快速、准确的水产品弓形虫检测方法,来检测中国东南沿海水产品的弓形虫的感染情况,本实验首先对弓形虫国际标准强毒株RH株和CN猪株的核糖体DNA内转录间隔区ITS-1序列进行PCR扩增、克隆、测序和序列分析,以期找到一种合适的遗传标记建立一种能够用于水产品检测的PCR方法。结果发现CN株和RH株的ITS-1序列完全一致,且与GenBank上注册RH株的ITS-1序列也完全一致。从而验证了可以用弓形虫ITS-1序列作为遗传标记而建立弓形虫特异性PCR检测方法的可行性。随后本研究以弓形虫ITS-1序列为种特异性遗传标记,通过对PCR各组分以及PCR程序的逐一摸索建立了特异的弓形虫PCR检测方法。采用有限稀释法稀释弓形虫速殖子DNA,经PCR扩增,检测该方法的敏感性。用同一引物扩增牡蛎、鸡、虾、鱼、大肠杆菌、鸡球虫、虾皮下及造血组织坏死杆状病毒和弓形虫速殖子基因组DNA,检测PCR方法的特异性。该PCR方法最低可以检测500龟弓形虫速殖子DNA（相当于5个速殖子的DNA）。牡蛎、鸡、虾、鱼、大肠杆菌、鸡球虫、虾造血与组织坏死病毒基因组DNA均未扩增出条带,仅弓形虫基因组DNA出现特异性条带。从而表明该方法具有很好的特异性和敏感性,适用于弓形虫的检测。随后本研究采用已经建立的PCR检测方法对中国部分地区的太平洋大牡蛎（Crassostrea gigase）、克氏原螯虾（Procambarus clarkii）、斑节虾（Penaeus monodon）、鲫鱼（Carassius auratus）、黄鳝（Monopterus albus）等淡、海水产品共1849份进行了弓形虫检测。其中牡蛎、斑节虾、鲫鱼和黄鳝的检测结果全为阴性。仅在618只克氏原螯虾中检测到4例弓形虫阳性,总阳性率为0.6472%,且这4例阳性全部来自于江西省南昌市,该地的阳性率为2.5%。结果显示克氏原螯虾可以通过滤食的方法来富集周围环境中的弓形虫卵囊。其作为人类和水生动物弓形虫病的潜在传播途径还有待于进一步的研究。
二、贵州省三穗县猪弓形虫病流行病学调查（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、贵州省三穗县猪弓形虫病流行病学调查（论文提纲范文）
（3）湖南省猪的三种人畜共患病感染情况调查（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 第一章 前言 |
| 1.1 衣原体病 |
| 1.1.1 病原 |
| 1.1.2 流行病学 |
| 1.1.3 临床症状 |
| 1.1.4 病理变化 |
| 1.1.5 诊断 |
| 1.1.6 防制 |
| 1.2 弓形虫病 |
| 1.2.1 病原 |
| 1.2.2 流行病学 |
| 1.2.3 临床症状 |
| 1.2.4 病理变化 |
| 1.2.5 诊断 |
| 1.2.6 防制 |
| 1.3 布鲁氏菌病 |
| 1.3.1 病原 |
| 1.3.2 流行病学 |
| 1.3.3 临床症状 |
| 1.3.4 病理变化 |
| 1.3.5 诊断 |
| 1.3.6 防制 |
| 1.4 本研究的意义 |
| 第二章 湖南省猪衣原体感染情况调查 |
| 2.1 材料和方法 |
| 2.1.1 材料 |
| 2.1.2 方法 |
| 2.2 结果与分析 |
| 2.2.1 湖南省各市(州)猪衣原体感染情况 |
| 2.2.2 不同季节衣原体感染情况 |
| 2.2.3 不同猪群种类衣原体感染情况 |
| 2.3 讨论 |
| 2.4 小结 |
| 第三章 湖南省部分地区猪弓形虫感染情况调查 |
| 3.1 材料和方法 |
| 3.1.1 材料 |
| 3.1.2 方法 |
| 3.2 结果与分析 |
| 3.2.1 不同地区猪弓形虫感染情况 |
| 3.2.2 不同猪群猪弓形虫感染情况 |
| 3.3 讨论 |
| 3.4 小结 |
| 第四章 湖南省猪布鲁氏菌感染情况调查 |
| 4.1 材料与方法 |
| 4.1.1 材料 |
| 4.1.2 方法 |
| 4.2 结果与分析 |
| 4.2.1 虎红平板凝集试验(RBT)检测结果 |
| 4.2.2 试管凝集试验(SAT)检测结果 |
| 4.2.3 酶联免疫吸附试验(cELISA)检测结果 |
| 4.2.4 不同猪群种类猪布鲁氏菌感染情况 |
| 4.3 讨论 |
| 4.4 小结 |
| 第五章 全文总结 |
| 符号说明 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（4）龙岩市猪场弓形虫的血清学调查与分析（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 1 弓形虫病概况 |
| 1.1 弓形虫病流行状况及危害 |
| 1.2 弓形虫的基因研究进展 |
| 1.3 弓形虫病病原学特点 |
| 1.3.1 在猫体内的发育 |
| 1.3.2 在其它动物体内的发育 |
| 1.4 弓形虫病的治疗 |
| 1.4.1 早发现,早治疗 |
| 1.4.2 剂量要足,首次用量加倍 |
| 1.4.3 用药疗程够 |
| 1.5 弓形虫病的预防 |
| 1.6 弓形虫病人及各种动物的发病特点 |
| 1.7 弓形虫病的实验室诊断方法 |
| 1.7.1 病原学检查方法 |
| 1.7.2 免疫学诊断方法 |
| 1.7.3 分子生物学诊断方法 |
| 1.8 弓形虫疫苗研究进展 |
| 1.8.1 弓形虫全虫疫苗 |
| 1.8.2 基因工程亚单位疫苗 |
| 1.9 弓形虫疫苗研究小结 |
| 2 实验材料和方法 |
| 2.1 材料 |
| 2.1.1 血清来源 |
| 2.1.2 血清分离 |
| 2.1.3 检测试剂 |
| 2.1.4 试验材料 |
| 2.2 猪血清弓形体IgG的ELISA检测 |
| 2.3 结果判定 |
| 2.4 试验操作时应注意的事项 |
| 2.5 试验结果 |
| 3 结果分析与讨论 |
| 3.1 首次采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对龙岩市弓形虫进行血清学调查 |
| 3.2 龙岩市猪弓形虫抗体阳性率与部分省内、本市报道相符 |
| 3.3 不同日龄阶段和不同猪群猪弓形虫抗体情况不同(见表1) |
| 3.4 龙岩各县(市、区)猪场弓形虫感染平均为48.81%,各县(市、区)之间略有差异 |
| 3.4.1 通过连续2年对龙岩市各县(市、区)猪场采样,用ELISA对血清弓形虫抗体检测显示(见图2),总体猪场阳性率48.81%(41/84)。其中2011年为51.22%(21/41),2012年为46.51(20/43) |
| 3.4.2 通过对不同区县猪感染弓形虫阳性率检测显示(见图2),永定26.67%(13/60),上杭25.81%(40/155,),武平25.71%(45/175)这3个县较高,新罗,连城,长汀,漳平较低 |
| 3.5 通过对不同规模的猪场感染弓形虫检测发现,基本呈现猪场规模越大,弓形虫阳性率越低,反之,猪场规模越小,弓形虫阳性率越高 |
| 3.6 猪场与居民区距离越近,猪群弓形虫感染率越高,反之,猪场与居民区距离越远,猪群弓形虫感染率越低 |
| 3.7 猪场饲养其他牲畜的猪弓形虫感染率较高(见图3) |
| 3.8 省内外对各种畜禽弓形虫抗体阳性率调查表明,犬、猫、牛、羊、鸡等存在一定程度的抗体阳性率,其中犬、猫、牛、羊抗体阳性率较高,弓形虫病防控形势严峻 |
| 3.9 2011年-2012年对5个跟踪猪场弓形虫治疗情况,说明常规药物磺胺嘧啶对弓形虫的防治有效 |
| 3.10 从本次ELISA调查情况看,弓形虫感染率呈散发性的流行,其感染率的高低与饲养时间长短,饲养条件好坏等而有所差异 |
| 4 小结 |
| 4.1 龙岩市猪群弓形虫血清学阳性率为23.56%,不同猪群有一定差异 |
| 4.2 龙岩市猪场弓形虫阳性率平均为48.81%,各县(市、区)之间略有差异 |
| 4.3 猪场规模越大,猪群弓形虫阳性率越低,反之,猪场规模越小,猪群弓形虫阳性率越高 |
| 4.4 猪场与居民区距离越近,猪群阳性率越高,反之,距离居民区越远,猪群阳性率越低 |
| 4.5 猪场所饲养其他牲畜猫、狗、鸡等对猪群阳性率有影响.猪场饲养其他牲畜为阳性的,猪场也是为阳性 |
| 4.6 常规药物磺胺嘧啶对弓形虫的防治有效 |
| 附表1 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（5）贵州人畜共患弓形虫病的流行趋势与防控措施（论文提纲范文）
| 1 病原学 |
| 1.1 分类 |
| 1.2 病原的形态特征 |
| 1.2.1 速殖子 (Tachyzoite) |
| 1.2.2 包囊 (Cyst) |
| 1.2.3 裂殖体 (Schizont) |
| 1.2.4 配子体 (Gametocyte) |
| 1.2.5 卵囊 (Oocyst) |
| 1.3 生活史 |
| 2 流行病学 |
| 3 临床症状 |
| 3.1 猪 |
| 3.2 羊 |
| 3.3 牛 |
| 3.4 犬 |
| 3.5 猫 |
| 3.6 人 |
| 4 病理变化 |
| 5 诊断 |
| 5.1 病原学诊断 |
| 5.2 免疫学诊断 |
| 5.2.1 IHA |
| 5.2.2 ELISA |
| 5.2.3 DT |
| 5.3 分子生物学诊断 |
| 6 治疗 |
| 7 防控 |
（6）信阳地区猪弓形虫病血清学调查与分析（论文提纲范文）
| 1 材料和方法 |
| 1.1 样品采集 |
| 1.2 样品的制备 |
| 1.3 检测试剂盒及主要仪器 |
| 1.4 方法 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 猪弓形虫病整体检测结果 |
| 2.2 不同生长阶段猪群猪弓形虫病检测结果 |
| 2.3 不同月份猪弓形虫病感染情况 |
| 3 讨论 |
（7）惠水县猪弓形虫病的诊断与防治（论文提纲范文）
| 1 流行情况 |
| 2 临床症状 |
| 3 病理变化 |
| 4 诊断 |
| 5 治疗 |
| 6 综合预防措施 |
| 7 小结 |
（8）猪急慢性弓形虫感染ELISA鉴别诊断方法的研究与初步应用（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略语表 |
| 1 文献综述 |
| 1.1 弓形虫病及其危害 |
| 1.2 速殖子-缓殖子转换及重要的期特异性表达抗原 |
| 1.3 弓形虫病诊断方法的研究 |
| 1.3.1 病原学诊断方法 |
| 1.3.2 免疫学诊断方法 |
| 1.3.3 分子生物学诊断方法 |
| 1.4 弓形虫与动物性食品安全 |
| 2 研究目的及意义 |
| 3 材料与方法 |
| 3.1 试验材料 |
| 3.1.1 质粒、菌株、虫株及实验动物 |
| 3.1.2 酶及试剂盒 |
| 3.1.3 质粒抽提试剂 |
| 3.1.4 SDS-PAGE缓冲液 |
| 3.1.5 Western-blot缓冲液 |
| 3.1.6 细菌培养基 |
| 3.1.7 ELISA缓冲液 |
| 3.1.8 血清及酶标二抗 |
| 3.1.9 其他溶液 |
| 3.1.10 主要仪器 |
| 3.2 实验方法 |
| 3.2.1 弓形虫BAG1基因CDS的克隆 |
| 3.2.1.1 引物设计 |
| 3.2.1.2 组织包囊的收集与纯化 |
| 3.2.1.3 缓殖子总RNA的提取 |
| 3.2.1.4 第一链cDNA合成 |
| 3.2.1.5 PCR反应体系及程序 |
| 3.2.2 SAG1基因CDS的体外扩增 |
| 3.2.2.1 引物设计 |
| 3.2.2.2 弓形虫速殖子基因组DNA的提取 |
| 3.2.2.3 PCR扩增目的片段 |
| 3.2.3 重组表达质粒的构建及外源DNA序列测定 |
| 3.2.3.1 pMD18-T和目的基因片段的连接 |
| 3.2.3.2 大肠杆菌DH5α/BL21感受态细胞的制备 |
| 3.2.3.3 连接产物的转化 |
| 3.2.3.4 重组质粒DNA碱裂解法小量制备 |
| 3.2.3.5 重组质粒的酶切鉴定 |
| 3.2.3.6 重组表达质粒的构建与鉴定 |
| 3.2.4 弓形虫BAG1基因及SAG1基因在大肠杆菌中的原核表达 |
| 3.2.4.1 重组表达质粒的诱导表达 |
| 3.2.4.2 表达产物的SDS-PAGE分析 |
| 3.2.4.3 表达产物存在形式的检测 |
| 3.2.4.4 最佳IPTG浓度的确定 |
| 3.2.4.5 最佳诱导时间的确定 |
| 3.2.4.6 不溶性表达产物(包涵体)的提取 |
| 3.2.4.7 Western-blot试验 |
| 3.2.5 rBAG1间接ELISA及rSAG1间接ELISA方法的建立 |
| 3.2.5.1 ELISA操作步骤 |
| 3.2.5.2 抗原最佳包被浓度及血清最佳稀释倍数的确定 |
| 3.2.5.3 最佳封闭浓度和最佳封闭时间的确定 |
| 3.2.5.4 血清最佳作用时间的确定 |
| 3.2.5.5 二抗最佳浓度和最佳作用时间的确定 |
| 3.2.5.6 ELISA阴阳性临界点的确定 |
| 3.2.5.7 ELISA特异性试验 |
| 3.2.5.8 ELISA敏感性试验 |
| 3.2.5.9 ELISA重复性试验 |
| 3.2.5.10 ELISA保质期试验 |
| 3.2.6 猪急慢性弓形虫感染ELISA鉴别诊断方法的初步应用 |
| 4 结果与分析 |
| 4.1 弓形虫BAG1基因的原核表达 |
| 4.1.1 弓形虫组织包囊的收集与纯化 |
| 4.1.2 弓形虫缓殖子总RNA的提取 |
| 4.1.3 弓形虫BAG1基因CDS的PCR扩增 |
| 4.1.4 重组质粒pMD18-T-BAG1的酶切鉴定 |
| 4.1.5 重组表达质粒pET28a(+)-BAG1的酶切鉴定 |
| 4.1.6 重组表达质粒pET28a(+)-BAG1的测序与比对分析 |
| 4.1.7 重组质粒pET28a(+)-BAG1在E.coli中的表达 |
| 4.1.8 pET28a(+)-BAG1原核表达产物存在形式的分析 |
| 4.1.9 pET28a(+)-BAG1/BL21最佳诱导表达条件的分析 |
| 4.1.10 重组蛋白rBAG1的Western-blot分析 |
| 4.2 弓形虫SAG1基因的原核表达 |
| 4.2.1 弓形虫SAG1基因CDS的PCR扩增 |
| 4.2.2 重组质粒pMD18-T-SAG1的酶切鉴定 |
| 4.2.3 重组表达质粒pET28a(+)-SAG1的酶切鉴定 |
| 4.2.4 重组表达质粒pET28a(+)-SAG1的测序与比对分析 |
| 4.2.5 重组质粒pET28a(+)-SAG1在E.coli中的表达 |
| 4.2.6 pET28a(+)-SAG1原核表达产物存在形式的分析 |
| 4.2.7 重组蛋白rSAG1的Western-blot分析 |
| 4.3 rBAG1间接ELISA方法的建立 |
| 4.3.1 抗原最佳包被浓度和血清最佳稀释倍数的确定 |
| 4.3.2 最佳封闭浓度和最佳封闭时间的确定 |
| 4.3.3 血清最佳作用时间的确定 |
| 4.3.4 二抗最佳浓度及最佳作用时间的确定 |
| 4.3.5 ELISA阴阳性临界点的确定 |
| 4.3.6 ELISA特异性试验 |
| 4.3.7 ELISA敏感性试验 |
| 4.3.8 ELISA重复性试验 |
| 4.3.9 ELISA保质期试验 |
| 4.4 rSAG1间接ELISA方法的建立 |
| 4.4.1 抗原最佳包被浓度和血清最佳稀释倍数的确定 |
| 4.4.2 最佳封闭浓度和最佳封闭时间的确定 |
| 4.4.3 血清最佳作用时间的确定 |
| 4.4.4 二抗最佳浓度及最佳作用时间的确定 |
| 4.4.5 ELISA阴阳性临界点的确定 |
| 4.4.6 ELISA特异性试验 |
| 4.4.7 ELISA敏感性试验 |
| 4.4.8 ELISA重复性试验 |
| 4.4.9 ELISA保质期试验 |
| 4.5 猪急慢性弓形虫感染ELISA鉴别诊断方法的初步应用 |
| 5 讨论 |
| 5.1 抗原的选择 |
| 5.2 基因的克隆及表达 |
| 5.3 ELISA方法的建立 |
| 5.4 湖北省规模化猪场弓形虫病流行病学分析 |
| 6 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（9）五种猪繁殖障碍性疾病的血清学调查与分析（论文提纲范文）
| 1 材料 |
| 1.1 被检血清 |
| 1.2 主要诊断试剂 |
| 1.3 仪器 |
| 2 方法 |
| 2.1 血清学检测方法 |
| 2.1.1 猪细小病毒 (PPV) 、猪伪狂犬病毒 (PRV) 及猪乙型脑炎病毒 (JEV) 的抗体检测 |
| 2.1.2 猪圆环病毒2型 (PCV-2) 的血清学检测 |
| 1) 取于室温放置1 |
| 2) 甩掉孔中溶液, 用20倍稀释的洗涤液洗板5次, 每次200 |
| 3) 每孔加入羊抗猪酶标二抗100 |
| 4) 重复操作步骤2) 。 |
| 5) 每孔加入1滴 (50 |
| 6) 结果判定。 |
| 2.1.3 猪弓形虫的血清学检测 |
| 1) 检测。 |
| 2) 结果判定。 |
| 2.2 流行病学调查 |
| 2.3 饲养管理情况调查 |
| 2.4 临床症状调查和病理剖检 |
| 3 结果 |
| 3.1 5种猪繁殖障碍疾病血清学检测结果 |
| 3.2 规模场和散养户5种猪繁殖障碍疾病感染情况 |
| 3.3 种猪、商品猪5种猪繁殖障碍疾病感染情况 |
| 3.4 流行病学调查结果 |
| 3.4.1 流行及发病情况 |
| 3.4.2 防疫及饲养管理情况 |
| 3.5 临床症状和病理剖检结果 |
| 4 讨论 |
（10）我国部分地区水生动物弓形虫感染情况调查（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 参考文献 |
| 上篇 文献综述 |
| 第一章 弓形虫的危害 |
| 1 虫体特征及生活史 |
| 2 流行病学 |
| 2.1 人弓形虫病 |
| 2.2 野生动物及畜禽弓形虫病 |
| 2.3 水产品弓形虫病 |
| 参考文献 |
| 第二章 弓形虫病的实验诊断 |
| 1 病原学诊断 |
| 1.1 组织学诊断 |
| 1.2 动物实验和细胞培养法 |
| 2 免疫学诊断 |
| 2.1 美蓝染色实验 |
| 2.2 酶免疫技术 |
| 2.3 免疫金银染色法 |
| 2.4 乳胶凝集试验 |
| 3 核酸检测 |
| 3.1 核酸分子杂交 |
| 3.2 聚合酶链式反应 |
| 参考文献 |
| 第三章 弓形虫PCR诊断方法与PCR分子标记选择 |
| 1 弓形虫PCR检测分子标记的选择 |
| 1.1 ITS-1 |
| 1.2 B1基因 |
| 1.3 rDNA |
| 1.4 P30 |
| 1.5 529bp重复序列 |
| 2 弓形虫PCR诊断方法研究 |
| 参考文献 |
| 下篇 试验研究 |
| 第四章 弓形虫RH株与猪源CN株ITS-1序列分析 |
| 摘要 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 速殖子感染后小鼠腹腔液显微镜检查 |
| 2.2 基因组电泳分析结果 |
| 2.3 PCR扩增产物的电泳分析 |
| 2.4 重组质粒的筛选及鉴定 |
| 2.5 序列分析结果 |
| 3 讨论 |
| Abstract |
| 参考文献 |
| 第五章 刚第弓形虫PCR检测方法的建立及其敏感性性和特异性观察 |
| 摘要 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 PCR敏感性试验 |
| 2.2 PCR特异性试验 |
| 3 讨论 |
| Abatract |
| 参考文献 |
| 第六章 中国部分地区水生动物弓形虫感染情况调查 |
| 摘要 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 太平洋大牡蛎样品检测结果 |
| 2.2 斑节虾样品检测结果 |
| 2.3 克氏原螯虾样品检测结果 |
| 2.4 鲫鱼检测结果 |
| 2.5 黄鳝样品检测结果 |
| 2.6 阳性样品测序结果及分析 |
| 3 讨论 |
| Abstract |
| 参考文献 |
| 全文总结 |
| 致谢 |
四、贵州省三穗县猪弓形虫病流行病学调查（论文参考文献）
- [1]湖南省猪弓形虫和犬新孢子虫感染情况调查及弓形虫基因型研究[D]. 桂滨泽. 湖南农业大学, 2020
- [2]湖南省鸡衣原体、弓形虫感染情况调查及新城疫免疫效果监测[D]. 全敏秀. 湖南农业大学, 2020
- [3]湖南省猪的三种人畜共患病感染情况调查[D]. 陈世林. 湖南农业大学, 2019(08)
- [4]龙岩市猪场弓形虫的血清学调查与分析[D]. 童金水. 福建农林大学, 2014(11)
- [5]贵州人畜共患弓形虫病的流行趋势与防控措施[J]. 肖芳萍,徐洪忠,余波,杨茂生,任荣清,史开志. 中国畜禽种业, 2013(10)
- [6]信阳地区猪弓形虫病血清学调查与分析[J]. 刘琨. 河南农业科学, 2013(05)
- [7]惠水县猪弓形虫病的诊断与防治[J]. 赵福琼,阳德华,罗德彪,徐洪忠. 上海畜牧兽医通讯, 2013(02)
- [8]猪急慢性弓形虫感染ELISA鉴别诊断方法的研究与初步应用[D]. 熊冰清. 华中农业大学, 2012(01)
- [9]五种猪繁殖障碍性疾病的血清学调查与分析[J]. 杨明银,杨培昌,肖俊,文忠,胡自华. 黑龙江畜牧兽医, 2012(09)
- [10]我国部分地区水生动物弓形虫感染情况调查[D]. 杨振. 南京农业大学, 2010(06)